Глюкозооксидаза молекулярная структура

С самого начала следует уяснить, что белковая инженерия, т. е. направленная модификация белка, вообще возможна лишь при наличии детальной информации о нем. В идеальном случае предполагается, что третичная структура белка известна с разрешением, достаточным для локализации отдельных аминокислотных остатков. К гожалению, для многих белков, используемых в биосенсорах, такие данные либо вообще отсутствуют, либо их не хватает. Так, мы все еще довольно мало знаем о молекулярной структуре глюкозооксидазы-вероятно, наиболее широко используемого в биосенсорах, легко доступного (причем в весьма чистом виде и в достаточных количествах) фермента. До сих пор не описаны ни его аминокислотная последовательность, ни кристаллическая структура. Кинетические свойства глюкозооксидазы хорощо изучены [4], однако эта информация не опирается ни на какие структурные данные. Недостаток таких сведений означает, что нам часто трудно не только действительно конструировать белковые молекулы, но даже интерпретировать эффекты, вызванные модификацией на эмпирическом уровне. [c.101]

Структура. В качестве метки в иммуноферментном анализе обычно используют глюкозооксидазу из Aspergillus niger. Фермент представляет собой гликопротеин, содержащий 16% углеводных групп, молекулярная масса 160 000, в состав входят 2 молекулы связанного флавинадениндинуклео-тида. Коэффициент молярного поглощения фермента при длине волны 450 нм —1,41-10 М -см . В нативном состоянии сульф-гидрильные группы в молекуле фермента не обнаруживаются, однако после денатурации в 8 М мочевине титруются 1—2 SH-группы на молекулу белка. Фермент обладает высокой стабильностью и сохраняет активность при хранении в течение нескольких лет в замороженном виде в концентрации 10 мг/мл. [c.72]

Swoboda [17], исследуя апофермент глюкозооксидазы, отметил, что при отщеплении ФАД значительная часть апофермента (80%) имеет пониженную константу седиментации (равную 4,5 S против 8,0 S для нативного фермента), хотя молекулярный вес остается постоянным (153 000). При этом значительно изменяется стабильность белка к действию проназы и тепловой инактивации. Очевидно, при отщеплении ФАД происходят значительные изменения в структуре апофермента. При добавлении ФАД все эти изменения исчезают и полностью восстанавливается как исходная структура, так и активность фермента. Следует отметить, что частичное восстановление исходной структуры идет и тогда, когда вместо ФАД к апоферменту добавляется АДФ, хотя ферментативная активность при этом, конечно, не восстанавливается [28]. Это свидетельствует о важной роли адениловой части ФАД в образовании его комплексов с белками. Исследуя кинетику восстановления [c.160]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология