Точка начала репликации электронная микроскопия

Б. Для демонстрации того, что участки неспаренных оснований расположены в точке начала репликации, можно обработать ДНК рестриктазой, которая разрезает молекулу в строго определенном месте относительно точки начала репликации. (С помощью электронной микроскопии невозможно различить два конца линейной молекулы, поэтому, чтобы точно определить положение расплетенных областей, требуется обработка по крайней мере двумя разными рестриктазами.) Если в точке начала репликации расплетания не происходит, то расплетенные участки не захватят этот сайт (рис. 9-40, А). Если расплетание происходит в точке начала репликации, то расплетенный участок будет включать эту область. В случае когда расплетание распространяется в одном направлении, точка начала репликации совпадает с одним концом области расплетания (рис. 9-40, ). Когда расплетание происходит в обоих направлениях (с одинаковой скоростью), центр расплетенной области совпадает с точкой начала репликации (рис. 9-40, Б). Результаты данного эксперимента указывают на то, что расплетание происходит по обоим направлениям и примерно с одинаковой скоростью. [c.396]

В случае определенной линейной молекулы мы можем использовать электронную микроскопию для измерения расстояния от каждого конца глазка до конца ДНК. Затем положения концов глазков в молекулах, имеющих эти структуры различных размеров, можно сравнить. Если репликация однонаправленная, только один из концов будет подвижным, другой окажется фиксированным в точке начала репликации. Если репликация двунаправленная, перемещаться будут оба конца и точка начала репликации окажется равноудаленной от них. Определенную кольцевую молекулу ДНК необходимо перевести в линейную форму до электронной микроскопии (путем обработки рестрицирующим ферментом, разрезающим ее в уникальном сайте). [c.398]

Б. Эти эксперименты показывают, что структуры, наблюдаемые с помощью электронного микроскопа, расплетены в области точки начала репликации вируса SV40. Положение этой точки в геноме SV40 известно. Как с помощью рестриктаз доказать, что это именно точка начала репликации, и определить, в одном или дву направлениях происходит расплетание этого участка [c.144]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология