Выбор pH буфера для элюции

При выборе обменника решающую роль могут иногда сыграть факторы, на первый взгляд второстепенные. Например, жесткость обменника и сохранение объема при изменениях pH и ионной силы элюента могут играть очень важную роль в случае разделения смеси компонентов, сильно различающихся между собой по сродству к обменнику, когда для элюции может оказаться необходимым использование широкого диапазона концентраций соли или pH буфера, [c.288]

ВЫБОР pH БУФЕРА ДЛЯ ЭЛЮЦИИ [c.290]

Разумеется, исследователь редко располагает кривыми титрования всех белко , входящих в состав смеси, и выбор ойтимального значения pH производится эмпирически (как описано ниже). Но здесь мы хотели проиллюстрировать то обстоятельство, что подбор оптимального для фракционирования белков значения pH буфера элюции является делом не только очень важным, но и весьма тонким. Отклонение на одну единицу pH в безобидной нейтральной области для приведенного выше (вполне реального) примера трех кислых белков могло привести к отсутствию разделения двух пз них. [c.265]

За посадкой препарата на сорбент следует этап собственно очистки — вымывания из геля прочих компонентов исходной смеси. Промывку сорбента ведут на фильтре или в колонке, в зависимости от выбора метода элюции. В качестве раствора для промывки обычно используют тот же буфер, что и при посадке препарата на сорбент. Иногда несколько увеличивают содержание в нем агентов, способствующих снятию с сорбента неспецифически сорбировавшихся примесей, имея в виду, что уже образовавшийся комплекс вещества с лигандом устойчивее к их воздействию, чем процесс образования этого комплекса. [c.406]

Этот выбор диктуется характером задачи, которая решается гель-фпльтрацией, и свойствами разделяемых молекул, в первую очередь их массами. Для обессоливаиия раствора макромолекул естественно использовать жесткие, достаточно мелконористые матрицы с крупными гранулами (последнее — для увеличения скорости течения), например сефадекс С-25 или биогель Р-б. Для обессоливания более мелких молекул можно воспользоваться сефадексами С-10 и С-15 или биогелями Р-2 и Р-4. Названные матрицы удобны и для смены буфера, в котором первоначально находится препарат, на тот, которым уравновешена колонка и производится элюция, или для освобождения биополимеров от радиоактивных низкомолекулярных предшественников. Близка к описанным н задача рассортировки смеси на две группы веществ — высокомолекулярных и низкомолекулярных (например, отделение белков от пептидов или нуклеиновых кислот от белков). Здесь, очевидно, следует вы- [c.133]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология