Зональный электрофорез в вертикальных колонках

ЗОНАЛЬНЫЙ ЭЛЕКТРОФОРЕЗ В ВЕРТИКАЛЬНЫХ КОЛОНКАХ [c.260]

В основе этого метода лежит фронтальный, а не зональный электрофорез (разд. 4.1). Амфотерные вещества, такие, как аминокислоты и пептвды, разделяют на специально предназначенной для этого вертикальной колонке одновременно в градиенте как pH, так и напряжения. Каждое вещество движется к той части колонки, где значение pH соответствует его изоэлектрической точке, и там останавливается (фокусируется) [c.134]

Для достижения максимального разделения используют диск-электрофорез— важное усовершенствование зонального электрофореза. (Как будет видно, термин диск относится не к форме полос, получаемых в этом методе, а к тому, что в системе используются неоднородные значения pH, что приводит к прерывистому напряжению.) Метод состоит в том, что первоначальный тонкий слой образца (1—2 мм) концентрируется в сверхтонкую стартовую зону толщиной от 1 до 100 мкм, как показано на рис. 9-12. Заметим, что гель находится в вертикальной колонке и представляет собой три отдельные области верхнюю, или область образца, среднюю, называемую прокладкой, и нижнюю, состоящую из собственно разделяющего геля. Область образца и гель-прокладка имеют меньшую концентрацию (больший размер пор), чем разделяющий гель, и готовятся в бустере с низкой ионной силой и различными значениями pH. Больший размер пор верхних слоев геля означает, что молекулы в них задерживаются меньше, двигаясь при этом быстрее, чем в нижнем геле. Кроме того, меньшая ионная сила обусловливает большее электрическое сопротивление, поэтому электрическое поле (Б/см) в верхнем геле больше, что также приводит к большей скорости движения молекул в верхнем геле по сравнению с нижним гелем. Соотношение значений pH по слоям приводит к такому же влиянию на подвижность. Быстрое движение через верхние слои геля приводит к накопле [c.235]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология