Терминаза

НОЙ стадии эти конкатемеры превращаются в зрелые линейные моно.меры с липкими концами. Процесс созревания ДНК сопряжен с ее упаковкой в предшественники фаговы.х головок. При этом активируется фагоспецифическая эндонуклеаза (в данном случае ее называют терминазой или матуразой), которая вносит ступенчатые разрывы в уникальные места — так называемые со5-участ-ки—обеих цепей фаговой ДНК (рнс. 144), [c.276]

Если эффективность близка к желаемому уровню, но все же недостаточно высока, ее можно увеличить в 3 раза, добавив к упаковочной смеси грубый препарат Я,-терминазы. Терми-наза представляет собой фаговый белок, который расщепляет лигированную ДНК в сое-сайте после упаковки ее в головке фага. Как правило, именно терминаза является фактором,. [c.109]

Конструирование фаговых головок и хвостовых отростков. ДНК фага X упакована в гексагональную головку, образованную несколькими белками (рис. 5.12). К головке прикреплен хвостовой отросток, построенный из других белков. Белки головки и хвостового отростка кодируются геномом фага X (рис. 5.9) и синтезируются в клетках бактерий, инфицированных фагом. При литической инфекции происходит объединение белков головки с образованием пустых головок (рис. 5.13). Эти головки взаимодействуют с комплексом, образуемым кон-катемериой Х-ДНК и фаговым белком терминазой, которая специфически связывается с ДНК вблизи со5-сайтов. Затем ДНК упаковывается в головку, начиная с левого конца молекулы, при этом полноразмерный линейный геном фага X образуется в результате эндоиуклеазиого разрезания в os-сайтах, катализируемого терминазой. В результате образуются липкие концы, типичные для зрелой линейной ДНК фага X. На последнем этапе происходит прикрепление к головке уже сформированных хвостовых отростков, и процесс образования фаговой частицы заверщается. [c.241]

Приготовление экстрактов для осуществления упаковки 1П vitro ДНК фага X. Используют два щтамма Е. oli, каждый из которых лизогенен в отнощении определенного мутантного щтамма фага X. Один из мутантов не способен синтезировать белок А, другой-белок Е. Оба этих белка необходимы для упаковки ДНК фага X. А -и Е"-экстракты смешивают и добавляют конкатемерную ДНК фага X, которая связывается с терминазой прежде, чем происходит разрезание в os-сайтах, и упаковывается в фаговые головки. [c.243]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология