Литическая инфекция

ЛИТИЧЕСКАЯ ИНФЕКЦИЯ. Фаговая инфекция, заканчивающаяся разрушением бактериальных клеток и выходом фагового потомства. [c.523]

Фаговая ДНК может экспрессироваться о образованием новых вирионов, что приводит, к литической инфекции [c.975]

Известно два случая, когда выключение экспрессии одних генов и включение других связано с заменой сиг-ма-фактора. Одно из этих явлений-спорообразование, или споруляция-состоит в резких морфологических изменениях, переводящих бактерии в покоящуюся форму (спору), способную переживать неблагоприятные условия. Другое явление обнаруживается при литической инфекции клетки бактериофагом. Когда инфекция развивается по этому пути, то в конце концов в результате размножения фага клетка погибает. Во всех наиболее простых случаях при развитии фага происходит переключение транскрипции. Однако известен только один хорошо изученный случай, когда изменения транскрипционной специфичности обусловлены заменой клеточного сигма-фактора на фаговый. (Это обнаружено в бактериях, способных образовывать споры.) Чаще изменения происходят под действием других механизмов-обычно с использованием дополнительных факторов транскрипции. Создается впечатление, что регуляторный механизм, основанный на возникновении изменений в самой РНК-полимеразе, неохотно используется клеткой, и только в качестве последней возможности. Вероятно, что способность использовать заменяемые друг друга сигма-факторы эволюционно возникла только у очень ограниченного круга бактерий. [c.157]

При расщеплении димерные С-концевые домены отделяются от N-концевых доменов, которые связаны с оператором. Как показано на рис. 16.10, N-концевые области после этого не обладают уже достаточным сродством, чтобы оставаться связанными с оператором. Они отделяются от ДНК, открывая тем самым путь для литической инфекции. [c.214]

Несовпадение во времени синтеза вирусных белков и синтеза белков, кодируемых генами клетки, пока еще не получило объяснения и может рассматриваться лишь как факт. То, что происходит в случае литической инфекции, является отклонением от основных принципов орбитальной системы, представленной на рис. 28. [c.66]

Литическая комплементация гораздо проще. Клетки His заражают пулом гибридных фагов и высевают на минимальные чашки без гистидина. Тот фаг, который комплементирует клетки His , должен бы образовывать бляшки. Однако все клетки заражены и потому не могут расти и образовывать газон. В результате если проводить высев обычным образом, то должны бы образоваться бляшки (прозрачные пятна) на прозрачной чашке. Поэтому важно, чтобы на такие чашки высевалось очень много клеток — столько, чтобы чашка слегка замутилась. Тогда можно будет ясно разглядеть прозрачные бляшки. Так как во время литического цикла происходит активная транскрипция генома фага X, то желательно, чтобы клонированная последовательность, попавшая в центральную область генома фага, транскрибировалась и с какого-нибудь фагового промотора. В этом случае встроенные гены могут экспрессироваться во время литического цикла инфекции, даже если при них нет собственного промотора. Поэтому фаг, выявленный на основании результатов комплементации при литической инфекции, может быть и неспособным комплементировать в двойном лизогене. Поскольку бля- [c.43]

Поздняя стадия литической инфекции [c.69]

И. Животные клетки, в которых не развивается литическая инфекция, [c.33]

Развитие персистентной инфекции связано не только с изменениями вируса. При персистентной инфекции клеток L наблюдаются мутации как в вирусной частице, так и в клетке. Описаны мутантные клетки L (линия LR), в которых реовирус дикого типа не способен вызывать литическую инфекцию [8, 140]. Для них характерна измененная ультраструктура [256]. [c.309]

Клональный изолят вируса (L/ ), выделенный из персистентно инфицированных клеток L, приводит к литической инфекции [c.309]

Литический путь. Определим сначала порядок экспрессии генов при литической инфекции. На рис. 3.80 показано расположение основных структурных и регуляторных генов на кольцевой и линейной картах фагового генома. Гены, кодирующие [c.182]

Линейный геном бактериофага X, Заштрихованы гены, необязательные для литической инфекции. Светлый овал-область начала репликации, Е-Есо RI-сайты. [c.239]

В двух проведенных за последнее время исследованиях было показапо, что в трапсфорынрованных клетках транскрибирована меньшая часть вирусного генома, чем это имеет место при литической инфекции [313, 415]. [c.273]

Некоторые фаги используют для выживания только одну линию поведения. Инфицируя чувствительную бактерию, они нарушают ее функции, с тем чтобы обеспечить образование большого числа фаговых частиц-по-томков. В результате такой литической инфекции бакте-рия-хозяин погибает. В процессе типичного литического цикла фаговая ДНК (или РНК) проникает в клетку бакте-рии-хозяина, ее гены транскрибируются в установленном [c.205]

Задержанно ранние гены включают в себя два гена репликации (необходимых для литической инфекции) и семь генов рекомбинации (некоторые из них отвечают за рекомбинацию при литической инфекции два гена необходимы для интеграции ДНК фага лямбда с бактериальной хромосомой при лизогенизации). Функции двух ге-нов-регуляторов, ll/ lll, необходимы для инициации синтеза лизогенного репрессора. Регуляторный ген Q кодирует фактор антитерминации, благодаря которому бактериальная РНК-полимераза получает возможность приступить к транскрипции поздних генов. Таким образом, задержанно ранние гены служат для двух целей одни из них необходимы для установления фагом лизогенного со- [c.208]

Другое необычное свойство фага Ми связано с наличием в его геноме, вблизи правого конца, сегмента G, или инвертируемого сегмента. Он имеет протяженность около 3 т.п.н. и в различных молекулах ДНК фага Ми представлен в различной ориентации. У фага, полученного в процессе литической инфекции штамма Е. oli К12, G-сегмент всегда находится в ориентации, получившей название 0( -1-). Если же фаг получают в результате индукции, его ДНК может содержать G-сегмент либо в этой же, либо в противоположной, G( —), ориентации. Для осуществления инверсии требуется ген фага Ми, названный gin и локализованный сразу же за пределами G-сегмента. [c.470]

В клетках Е. соИ могут содержаться и другие репликоны, способные существовать отдельно от бактериальной хромосомы. Они называются эписомами, и плазмидами, и представляют собой кольцевые молекулы ДНК различных размеров от 10 н.п. до почти трети величины самой бактериальной хромосомы. Одна из наиболее интересных и тщательно изученных эписом получила наименование F-фактора (фактора фертильности). F-фактор определяет половой процесс у Е. соН. Эписома-это генетический элемент, который может существовать либо в форме репли-кона отдельно от бактериальной хромосомы, либо встраиваться в бактериальную хромосому и составлять при этом часть репликона бактерии. Эписомой является и бактериофаг X, способный существовать как вне клетки в форме фага, так и внутри бактериальных клеток, либо в качестве отдельного репликона (при литической инфекции), либо в форме профага, составляя часть бактериального репликона. В противоположность эписомам, плазмиды не встраиваются в другие репликоны, а всегда существуют в форме свободных (автономных) репликонов. Умеренный фаг Р1, находясь в состоянии профага, представляет собой плазмиду, существующую отдельно от бактериального репликона. Однако, больщинство плазмид не покидают пределов клетки и не образуют внеклеточных форм. [c.231]

Только малая часть культивируемых клеток млекопитающих способна в любой момент времени так поглощать ДНК, что очень немного клеток из популяции оказываются первоначально инфицированными. Однако в течение нескольких следующих дней каждая из этих клеток поддерживает литическую инфекцию и продуцирует более 1 млн. вирусных частиц, которые способны внедряться в соседние клетки и инфицировать их с высокой эффективностью. Обычно лизат, полученный из одного набора инфицированных клеток, должен быть пассирован 1 или 2 раза для получения вирусного материала в высоком титре. В случае рекомбинантов ранней замены этот вирусный материал состоял исключительно из рекомбинантных геномов, инкапсидированных в белки оболочки SV40 в случае рекомбинантов поздней замены он включает приблизительно равные количества частиц вируса-помощника и рекомбинантов. Оба типа вирусного материала могут быть использованы для инфицирования пермиссивных клеток с высокой эффективностью и для индуцирования литических циклов размножения вируса. Во время таких инфекций вирусные геномы транспортируются к ядру, где они высвобождаются из капсидов. Ранний промотор вскоре становится активным и под его контролем экспрессируются гены. К 12 ч после инфекции происходит репликация вирусной ДНК и начинают экспрессироваться с высокой эффективностью гены позднего промотора. К 36—48 ч инфекции вновь синтезированные вирусные геномы начинают собираться в потомство вирусных частиц — процесс, который продолжается в течение следующих 24 ч, когда клетки отделяются от своего субстрата и погибают. [c.171]

Описанные ранее системы клеток эукариотов обеспечивают только-кратковременную экспрессию генов-спутников (passenger genes) либо потому, что клетки-хозяева погибают вследствие литической инфекции, либо потому, что химерные геномы только кратковременно присутствуют в клетках. Линии клеток, которые непрерывно экспрессируют индивидуальные клонированные гены вируса гриппа, могут обеспечивать более удобный источник белка. Более того, используя активность слияния НА, они могут привести к развитию систем для доставки экзогенных генов и белков к клеткам. И наконец, они открывают путь исследованиям в области регуляции цитотоксических Т-клеточных ответов на вирусспецифические поверхностные антигены. [c.177]

Персистентной инфекции культур клеток при полном отсутствии ЦПД или минимальном его проявлении можно добиться несколькими способами. Одним из них является пассирование вируса с высокой множественностью инфекции и пересев выживающих клеток. Другие методы включают заражение частично устойчивых клеток в присутствии противовирусных антител или интерферона. Для получения персистентно инфицированных культур можно инкубировать клетки, зараженные температурно-чувствительными мутантами РСВ при частично ограничивающей размножение температуре для подавления ЦПД. Такие культуры после установления персистенции поддерживают при той же температуре. Исход опыта зависит от конкретных свойств используемого мутанта. Температурно-чувствительные мутанты комплементационной группы В, продуцирующие при неразрешающей температуре лишь небольшое количество антигена, не подходят для данной цели, поскольку дают либо абортивную, либо литическую инфекцию. С другой стороны, мутанты группы D, синтезирующие при неразрешающей температуре значительное количество антигена, воспроизводимо дают персистентно инфицированные культуры, которые можно пассировать неограниченное число раз [39]. Персистентно инфицированные культуры служат хорошим источником вирусного антигена для проведения анализа по методу ELISA (см. разд. 2.10). [c.159]

В лизогенных клетках продукт гена с1 - репрессор - выключает все фаговые гены, кроме с1, в том числе гены, необходимые для литического роста фага. Гены сП и III участвуют в установлении лизогенного состояния на ранней стадии заражения, но не нужны для поддержания состояния лизогении. Как мы уже знаем, белок СИ при участии белка СИ1 включает транскрипцию гена с1. Фаг X vir содержит мутации в местах связывания репрессора, которые теперь называются операторами репрессор не может связаться с такими мутантными операторами, и потому X vir вызывает литическую инфекцию даже в присутствии репрессора. Чтобы фаг X стал вирулентным, в нем, как нам теперь известно, должны возникнуть мутации в двух операторах, Ol и 0 . [c.86]

Исходно белок Сго был выделен из клеток, где шла литическая инфекция, в опытах по связыванию с фильтрами. Это был один из белков, которые специфически связывались с ДНК фага X. Соответствующий ген был клонирован и соединен с различными призводными /ас-промотора. В клетках, содержащих такие плазмидные конструкции, Сго может синтезироваться в различных количествах. Если содержание белка достаточно высоко (до нескольких процентов суммарного количества), его легко выделить, и многие биохимические подходы, использованные в случае репрессора, были применены и при изучении Сго. [c.116]

Тс, специфические к вирусу кори, получены в системе, сходной с описанной выше для вируса гриппа. Тс, специфические к цитомегаловирусу ( MV), получены от нормальных серопозитивных индивидуумов путем вторичной стимуляции in vitro с последующим накоплением реагирующих на антиген клеток в культуре, зависящей от ИЛ-2. Возможно, Тс играют роль в предотвращении реактивации MV, как это предполагают для EBV [4]. Следует отметить, что возможность применения схемы вторичной стимуляции in vitro для формирования Тс зависит от свойств вирусов. В случае вирусов, вызывающих литическую инфекцию лимфоидных клеток, этот подход, очевидно, затруднен. [c.24]

Каким образом осуществляется временная регуляция экспрессии вирусных тенов, обеспечивающая строго определенный порядок репликации вирусной ДНК, образования вирусных белков и сборку частиц бактериофага при литической инфекции Какие регуляторные механизмы определяют выбор лити-ческого или лизогенного пути развития для инфицирующих фагов Эти вопросы заслуживают того, чтобы обсудить их подробно. Пытаясь разобраться в них, мы увидим, насколько элегантно осуществляется взаимодействие различньж механизмов, которые используют прокариотические организмы для регуляции своих фенотипов. [c.182]

Типичные векторы. На рис. 5.11 представлен один из обычных A-векторов. Он короче генома фага A дикого типа более чем на 10 т.п.н. Небольшая необязательная область вблизи 43 т.п.н. и часть центральной необязательной области в нем деле-тированы. Все гены, необходимые для литической инфекции, остаются интактными, и молекула имеет достаточно большой размер, чтобы унаковываться в частицы бактериофага. Сохранены только два из пяти исходных сайтов для Есо RI они фланкируют необязательную часть ДНК протяженностью 7 т.п.н. Носле разрезания с помошью Есо RI образуются три фрагмента ДНК, один из которых соот- [c.240]

Конструирование фаговых головок и хвостовых отростков. ДНК фага X упакована в гексагональную головку, образованную несколькими белками (рис. 5.12). К головке прикреплен хвостовой отросток, построенный из других белков. Белки головки и хвостового отростка кодируются геномом фага X (рис. 5.9) и синтезируются в клетках бактерий, инфицированных фагом. При литической инфекции происходит объединение белков головки с образованием пустых головок (рис. 5.13). Эти головки взаимодействуют с комплексом, образуемым кон-катемериой Х-ДНК и фаговым белком терминазой, которая специфически связывается с ДНК вблизи со5-сайтов. Затем ДНК упаковывается в головку, начиная с левого конца молекулы, при этом полноразмерный линейный геном фага X образуется в результате эндоиуклеазиого разрезания в os-сайтах, катализируемого терминазой. В результате образуются липкие концы, типичные для зрелой линейной ДНК фага X. На последнем этапе происходит прикрепление к головке уже сформированных хвостовых отростков, и процесс образования фаговой частицы заверщается. [c.241]

Космиды по существу являются плазмццными векторами, присвоившими tw-сайт фага к для осуществления эффективной упаковки in vitro. Истинными гибридами между плазмидой и фагом являются фазмцды—линейные дуплексные молекулы ДНК, концы которых представляют собой сегменты ДНК фага X, содержащие все гены, необходимые для литической инфекции, а средняя часть—линеаризованную плазмиду. Функции реп- [c.247]

Фаг X - другой удобный вектор. Больщие участки его ДНК, имеющей в длину 48 кЬ, не являются необходимыми для литической инфекции или интеграции и могут быть замещены чужеродной ДНК. Были сконструированы мутантные фаги X, предназначенные для клонирования ДНК. Один из этих мутантов, который называется Agt = X, содержит два участка расщепления E oRl вместо пяти, имеющихся в фаге дикого типа (рис. 31.24). После расщепления центральный участок молекулы ДНК этого фага X можно удалить. Два оставщихся куска ДНК составляют вместе 72% длины всего генома. Это количество ДНК недостаточно [c.211]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология