Термолизин термостабильность

Другая цинксодержащая протеиназа термолизин, продуцируемый Ba illus thermoproteolyti us,— фермент, обладающий заметной термостабильностью. Он содержит также четыре связанных иона кальция [47, 48]. [c.116]

Термостабильность термолизина была подробно изучена (Ohta et al., 1966). Ферментативная реакция инициировалась добавлением протеазы к субстрату (карбобензокси-Gly-PrO Leu-А1а-Рго) при различных температурах в диапазоне 25—88°С. Между 25 и 80°С на графике Аррениуса наблюдалась линейная зависимость активности фермента от температуры. Выше 80°С сродство фермента к субстрату начинало снижаться. Авторы пришли к выводу, что механизм действия фермента одинаков как при низких, так и при высоких температурах и что фермент со-храняет свою структуру в пределах достаточно широкого температурного интервала. Одиако в приведенных выше экспериментах нельзя исключить возмолсного защитного эффекта субстрата. [c.299]

Недавно были опубликованы очень важные результаты дальнейших исследовании, касающихся роли кальция в термостабильности термолизина (Dahlquist et al., 1976). Показано, что избыток ионов Са + стабилизирует нативный голофермент, препятствуя тому, что, по-видимому, является кооперативным структурным переходом, приводящим в конечном счете к автолизу фермента при температурах выше 50°С. Подобным стабилизирующим действием не обладают ни цинк (присоединяющийся к участку, отличному от участков связывания четырех ионов Са2+), ни тербий (присоединяющийся к двойному участку связывания Са +). Если тербий присоединяется не к двойному участку связывания Са +, а к другим участкам молекулы, то при этом также наблюдается ее стабилизация, что навело авторов иа мысль о вовлечении в переход, вызывающий автолиз фермента, участка молекулы, отличного как от активного центра, так и от двойного участка связывания Са +. При условии, что ионы тербия прочно присоединены к двойному участку связывания Са +, удаление двух других ионов Са + из соответствующих участков приводит к необратимому изменению фермента, сохраняющего лишь около 40% исходной каталитической активности. Однако измененный таким способом термолизин денатурируется при низкой температуре и при нагревании не стабилизируется ионами Са +. [c.302]

Например, не удивительно, что трехмерная структура термоли- зина не обнаруживает каких-либо необычных стабилизирующих взаимодействий, так как апофермент имеет почти такую же термостабильность, как и другие протеазы различие состоит лишь в том, что термолизин имеет дополнительные участки связывания ионов Са +. С другой стороны, вероятно, все апоферредок- сины характеризуются высокой термостабильиостью, а главное различие между ними заключается в их сродстве к атомам же- леза и сульфид-ионам. [c.308]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология