Позитивные гибридные клоны

Сначала все слияния клеток проводят с предельно допустимыми разведениями популяции клеток — продуцентов МА против антигенов клеточных поверхностей. Последующий анализ обычно дает достаточно определенные результаты для того, чтобы можно было отобрать гибридные клоны, представляющие интерес. Этот этап не прост, если учесть, что первичная иммунизация крыс клетками мышиных лимфом требует 200—300 лунок с растущими клонами. Такое количество образцов нетрудно проверить с помощью ИФМ, однако приблизительно 5—20% лунок содержат клоны, продуцирующие МА против неизвестных мембранных компонентов. Поэтому следует проводить и негативный отбор, чтобы отбраковать клоны, которые секретируют МА к общим для всех клеток поверхностным антигенам. После того как с помощью ИМФ отбирают клоны, позитивные [c.179]

Примечание. С одной чашки можно снять до семи реплик. Время адсорбции для каздой последующей реплики необходимо увеличивать. Для получения достоверной информации о гибридных клонах необходимо с каждой чашки снимать по две реплики. Подучив информацию о гибридизации на двух фильтрах, нужно сравнить позитивные сигналы и отбросить те, которые не совпадают на обоих фильтрах как неспецифические сигналы. [c.34]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология