клеток ферментативно получаемые фрагмент

И ча с М,, Биологический код, пер, с англ,, М., 1971. ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ (генетич. инженерия), совокупность методов, позволяющих искусственно получать молекулы ДНК, содержащие генетич. информацию из двух или более источников любого биол. и (или) хим. происхожде-пия. Осп. этапы Г. и. I) фрагментация молекул ДНК из ра, л. источников (бактерий, вирусов, культуры клеток, ткапей, целых организмов), обычно с помощью рестрикта-зы, или искусств. х1[мико-ферментативный синтез фрагмента ДНК 2) расщепление с номогцью этого же фермента молекулы ДНК (вектора), способной автономно реплицироваться в клетке (обычно это плазмидная или вирусная ДНК) 3) соединение фрагментов ДНК с вектором в еди- [c.125]

Американский химик. Р. в Монреале. Окончил Массачусетский технол. ин-т. Степень докт. философии получил в Колорадском уи-те. С 1971 — проф. Йельского ун-та. Осн. работы относятся к химии нуклеиновых к-т. Исследовал ферментативный аппарат специфических хим. превращений поли нуклеотидных цепей рибонуклеиновых к-т. В середине 1970-х нашел в кишечной палочке необычный фермент, названньш им рибонуклеазой, или (РНКазой)Р, который специфически отщеплял фрагмент от 5 -концевой области предшественника транспортной РНК. Подобные ферменты затем обнаружил не только в бактериях, по и в животных клетках. У становил, что (РНКаза) Р состоит из РНК и белковых компонентов, которым только и приписывалась ферментативная активность, и что РНК можно отделять от белковых компонентов и вновь присоединять к ним. Далее выяснил, что отделенная от РНК белковая часть не обладает ферментативной активностью, однако последняя восстанавливалась при соединении белковой части с РНК. В результате в Р Н К-фрагментах [c.327]

В распоряжении исследователя имеется охарактеризованная кДНК, но ему требуются антитела, поскольку 1) нужный белок содержится в клетке в небольшом количестве или его трудно очистить, 2) либо необходимо получить антисыворотку, специфичную к определенному участку или субъединице данного белка. Последний подход обладает значительно большей избирательностью, чем скрининг группы моноклональных антител, и гораздо проще, чем выделение пептидных фрагментов путем ферментативного или химического расщепления. [c.142]

Один из важнейших инструментов генной инженерии—эндонуклеазы, ферменты, расщепляющие ДНК по специфическим последовательностям нуклеотидов внутри цепи (в противоположность экзо-нуклеазам, которые расщепляют ДНК с концов молекулы). Эти ферменты получили название рестрик-таз, поскольку их присутствие в бактериальной клетке ограничивает рост определенных бактериальных вирусов, называемых бактериофагами. Рестриктазы расщепляют ДНК на относительно небольшие фрагменты в участках последовательности строго определенной структуры. Этим их воздействие отличается от большинства других ферментативных, химиче- [c.36]

Для разрушения клеточных мембран суспензию клеток в соответствующей изотонической среде, например в 0,25 М сахарозе, подвергают воздействию ультразвуковых колебаний или обрабатывают клетки в механическом гомогенизаторе. вращение пестика которого производится вручную или механически в результате действия на ткань развивающейся при этом силы трения получаются препараты разрушенных клеток, не совсем точно называемые гомогенатами. Эти препараты содержат мало целых клеток и представляют собой суспензии ядер, мито.хондрий. микросом, других клеточных органелл и фрагментов плазматических мембран, а также растворимую фазу цитоплазмы — цитозоль. При помощи дифференциального центрифугирования суспензии разрушенных iiлeтoк при низких температурах разделяют на индивидуальные фракции. В табл. П.] представлены типичные фракции, полученные этим методом, и дано распределение нескольких важнейших ферментативных систем и реакционных путей в этих фракциях. [c.390]

ДНК клетки) или отдельные ее фрагменты. В последнем случае, чтобы получить достаточное количество таких фрагментов, необходимо, амплифици-ровать (размножить) их. Для этого пользуются полимеразной цепной реакцией — быстрым методом ферментативной репликации определенного фрагмента ДНК. С его помощью можно амплифицировать любой участок ДНК, расположенный между двумя известными последовательностями. [c.36]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология