Химико-ферментативный синтез фрагментов ДНК

Рис. 208. Два подхода к получению двухцепочечных по-пинук-пеотидов методами химико-ферментативного синтеза а — использующий для соединения отдельных фрагментов реакцию, катализируемую Т4 ДНК-лигазой й — с применением репаративной достройки частичного дуплекса с помощью ДНК-полиме-разы ( —5 -фосфорилированный олигонуклеотид -алнгонуклестид, не

Основные принципы химико-ферментативного синтеза двунитевых фрагментов ДНК разработаны Кораной в конце 60-х годов Они предусматривают несколько этапов данного процесса [c.254]

Химико-ферментативный синтез фрагментов ДНК [c.370]

Дальнейшее совершенствование способов химико-ферментативного конструирования фрагментов нуклеиновых кислот обусловлено применением для синтеза олигонуклеотидов фосфамидного и фосфитного методов, исполь- [c.68]

Л И час М., Биологический код, пер. с англ.. М., 1971, ГЕННАЯ ИНЖЕНЕРИЯ (генетич. инженерия), совокупность методов, позволяющих искусственно получать молекулы ДНК, содержащие генетич. информацию из двух или более источников любого биол. и (или) хим. происхождения. Осн. этапы Г. и. 1) фрагментация молекул ДНК из разл. источников (бактерий, вирусов, культуры клеток, тканей, целых организмов), обычно с помощью рестрикта-зы, или искусств, химико-ферментативный синтез фрагмента ДНК 2) расщепление с помощью этого же фермента молекулы ДНК (вектора), способной автономно реплицироваться в клетке (обычно это плазмидная или вирусная ДНК) 3) соединение фрагментов ДНКс вектором в еда- [c.125]

МЕТОДЫ ХИМИКО-ФЕРМЕНТАТИВНОГО СИНТЕЗА ДВУХЦЕПОЧЕЧНЫХ ФРАГМЕНТОВ ДНК [c.59]

Чтобы создавать рекомбинантные ДНК, несущие желаемый ген, необходимо прежде всего располагать этим геном. Для этого используют три основных способа. Во-первых, если известна первичная структура белка, получение которого желательно осуществить методами генетической инженерии, можно, основываясь на генетическом коде, построить нуклеотидную последовательность, программирующую этот белок, и осуществить химико-ферментативный синтез гена. Так, например, были осуществлены синтезы нескольких генов, кодирующих различные интерфероны. Во-вторых, можно выделить из тканей, в которых происходит экспрессия гена, информационные РНК, среди которых должна присутствовать и мРНК, кодирующая необходимый белок, провести с помощью обратной транскриптазы синтез комплементарной ДНК (сокращенно кДНК) и перевести ее в двунитевую структуру с помощью Д П<-полимеразы. Можно, наконец, вырезать желаемый ген непосредственно из ДНК того объекта, бело которого собираются продуцировать. Два последних подхода не дают сразу же индивидуального гена и требуют предварительного отбора из сложной смеси кДИК или фрагментов хромосомной ДНК. Эта проблема решается уяЛ на уровне илстои микроорганизмов, в которые введены новые наследственные программы, и пути ее решения будут изложены несколько ниже. [c.301]

МЕТОДЫ ХИМИКО-ФЕРМЕНТАТИВНОГО СИНТЕЗА ДВУХЦЕПОЧЕЧНЫХ ФРАГМЕНТОВ ДНК 71 RVGYIELDLNSGKILESFRP [c.71]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология