Белковое праймирование

Аденовирусы реализуют уникальный процесс инициации репликации ДНК, известный как белковое праймирование. Вирусный белок рТР ковалентно соединяется с дезоксицитозин-монофосфатом, чья 3 -гидроксильная группа выступает в качестве праймера для последующего наращивания цепи, комплементарной считываемой цепи реплицрфуемой ДНК. Синтез [c.374]

Случайное объединение гомологичных мутантных фрагментов ДНК, в сумме составляющих всю структурную часть гена (DNA shuffling), с последующей экспрессией собранных таким путем генно-инженерных конструкций является еще одним распространенным и эффективным способом повышения разнообразия пула белковых молекул, используемых в направленной эволюции [85]. Реализацию этого подхода осуществляют в два этапа. Прежде всего, структурную часть гена в составе экспрессирующего вектора подвергают мутагенному воздействию, получая популяцию молекул ДНК, содержащих случайные мутации. Мутантные белки (следовательно, и кодирующие их гены) подвергают отбору на наличие в них определенных свойств (см. ниже). На втором этапе отобранные мутантные гены, которые кодируют требуемые белки, фрагментируют ДНКазой I и объединяют друг с другом in vitro с помощью ПЦР в отсутствие праймеров (рис. 43, а). Вместо инкубации с ДНКазой I для фрагментации генов также применяют ПЦР со случайным праймированием, осуществляемым короткими праймерами, которые обладают несколькими местами посадки в гене (рис. 43, б). [c.327]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология