Ретровирусная ДНК транскрибируется

Ретровирусная ДНК транскрибируется только в том случае, если она интегрирована с геном клетки-хозяина [c.190]

Продукт ORF В Ту-элемента отчасти гомоло-1ичен полипептидам, кодируемым ретровирусными генами pol (табл. 10.4). У ретровирусов эти гены кодируют несколько ферментов, в том числе про-теазу, эндонуклеазу, называемую также интегразой, и обратную транскриптазу (RT). Если в дрожжевых клетках Ту-элемент эффективно транскрибируется и транслируется, то в клеточных экстрактах обнаруживается активная обратная транскриптаза, а в частично очищенных фракциях таких экстрактов при добавлении дезоксинуклеозидтрифосфатов и синтезируется Ту-ДНК. Внесение мутации в ORF В приводит к утрате ферментативной активности, показывая еще раз, что обратная транскриптаза кодируется Ту-элементом. Клетки, в которых [c.252]

Во-вторых, промотор, находящийся в 3 LTR провируса, может направлять транскрипцию соседних генов хозяина. Более того, мощные усилители транскрипции провируса также могут активировать транскрипцию разных (даже удаленных) генов хозяина, включая онкогены. Избежать подобного эффекта удалось, разработав самоинактивирующиеся ретровирусные векторы. Промотор и активатор транскрипции ретровируса расположены в области U3 обоих вирусных LTR (см. рис. 14.38). Для вируса жизненно важной является область U3 в 5 LTR провируса, так как с этого промотора транскрибируется геномная РНК, вирусная РНК содержа единственный участок иЗ в 3 -концевой части молекулы и при обратной транскрипции область иЗ копируется в 5 LTR провируса. В самоинактивирующихся ретровирусных векторах с помощью рестриктаз делетируют основную часть области иЗ в 3 LTR для удаления промотора и усилителя транскрипции. В такой вектор можно поместить целевой ген с любым подстроенным к нему промотором (рис. 14.47). После трансфекции упаковывающих клеток гибридная ДНК интегрируется в хромосомную ДНК, и с провируса транскрибируется как вирусная геномная РНК (с делецией в области иЗ [c.412]

Векторы, сконструированные путем клонирования в клетках Е. соН, трансфицируются непосредственно в с о ответствую шие клетки животных. На 5 -конце TTR находится элемент, ответственный за регуляцию транскрипции с помошью РНК-полиме-разы II, на З -конце—сигнал терминации транскрипции. Соответственно синтезируемая РНК по существу представляет собой вирусный геном (рис. 5.41), за исключением одного или нескольких невирусных сегментов, находящихся между 5 - и З -концами. Следует отметить, что Е. сой-последовательности вектора не транскрибируются и не присутствуют в рекомбинантной РНК ретровирусного генома. [c.269]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология