Асимптотические и приближенные методы

Рассмотрим сначала вопрос о количестве необходимого фермента. Если ответы на вопросы 2 и 3 будут соответственно да и нет , то для решения вопроса I нужно будет использовать большое количество сопрягающего фермента, чтобы создать такие условия, в которых общая скорость реакции лимитировалась бы определяемым ферментом. Метод проб и ошибок может помочь в этом отношении, но если сопрягающие ферменты стоят дорого, то важно знать, какое минимальное их количество необходимо. Часто в опубликованных методах рекомендуются неоправданно большие количества сопрягающих ферментов, которые могут иметь только хорошо финансируемые исследователи. Основной принцип заключается в том, что необходимо достичь стационарного состояния, при котором скорость реакции, катализируемой индикаторным ферментом, равна скорости реакции с участием определяемого фермента. Теоретически этого, однако, нельзя достичь, а можно лишь асимптотически приближаться к такому состоянию. Поэтому, во-первых, следует решить, насколько близко хотелось бы приблизиться к этому состоянию и за какой период времени. Типичное спектрофотометрическое определение занимает несколько минут при измерении объемов с помощью пипеток и регистрации данных в приборе точность определения редко бывает выше чем 2%. Если мы ограничим наши требования и удовлетворимся тем, что через 1 мин после запуска реакции достигается 98% истинной скорости, то количество нужного нам фермента не будет слишком большим. [c.299]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология