Б о р и с о в. Культивирование клеток сердца

При подходящих условиях культивирования клетки сердца мыши сокращаются с характерной частотой, которая может возрастать при добавлении циклического АМР или ингибиторов его гидролиза. Добавление норадреналина приводит к увеличению частоты сокращений за счет повышения внутриклеточного уровня сАМР. [c.263]

Гистохимическими методами изучена динамика содержания гликогена в клетках первично-эксплантированных (почечная ткань макаки-резус, клетки амниона человека, фибробласты куриного эмбриона) и перевиваемых (амнион человека, сердце макаки-циномоль-гус, НеЬа, Нер-2) однослойных культур ткани. Обнаружена зависимость интенсивности отложения гликогена от количества его в исходных тканевых клетках. В первично-эксплантированных культурах в течение первых суток культивирования отложение гликогена незначительно, оно усиливается на 3—4-е сутки культивирования. В перевиваемых клеточных линиях уже на первых этапах культивирования отмечены значительные отложения гликогена. Это связано, очевидно, с разной степенью адаптации клеток двух категорий [c.217]

Оптимальной, на наш взгляд, схемой получения устойчивых к Са + дифференцированных клеток сердца является разработка Нага и соавторов [19], учитывающая преимущества более ранних методик. Извлеченное сердце гепаринизированной перед забоем (1000 ед гепарина на 1 кг массы) крысы (200—300 г) помещают в 10 мл охлажденного до О °С бескальциевого физиологического раствора Кребса—Рингера (РКР) на фосфатном буфере, pH 7.4, содержащем 5 10 М глюкозы и 1 % бычьего сывороточного альбумина. Перфузионный аппарат наполняют 50 мл бескальциевого РКР, предварительно оксигенированного продуванием смесью 95 % Ог и 5 % СО2. Через аорту (извлекая сердце, сохраняют ее участок длиной около 5 мм) вводят канюлю и промывают сердце РКР в течение 15 мин при 37 °С (на эту процедуру обычно расходуется около 25 мл физиологического раствора) при этом сердце часто сохраняет.сократительную активность. Перфузию продолжают оксигенированным РКР, содержащим 0.1 % коллагеназы, 0.1 % гиалуронидазы и 1 % бычьего сывороточного альбумина (к этому времени сокращения миокарда прекращаются). После окончания перфузии размягченную и потерявшую упругость ткань разрезают на 4 кусочка, удалив предсердия и крупные сосуды, затем повторно по 10— 15 мин до 3—4 раз инкубируют в растворе ферментов в РКР, отделяя клетки легким встряхиванием. Полученные фракции объединяют и отмывают центрифугированием (3—5 мин при 37 °С, 800 об/мин) на настольной центрифуге. Сходная методика получения изолированных клеток для культивирования описана Клэйкомом и Лэнсо-ном [14]. [c.292]

Исследование проблемы старения нормальных клеток многоклеточных организмов имеет весьма интересную историю. Впервые мысль о том, что нормальные соматические клетки животных и человека детермениро-ванно должны терять способность к делению и гибнуть, была высказана великим немецким биологом Августом Вейсманом в 1881 г. Эта мысль не казалась очевидной. Приблизительно в это же время исследователи научились переводить клетки животных и человека в культуру, т.е. культивировать их in vitro при подборе соответствующих сред. В начале века известный хирург, один из основателей техники культивирования клеток in vitro, лауреат Нобелевской премии Алексис Каррель поставил эксперимент, который продолжался 34 года. В течение этого срока он культивировал клетки фибробластов, полученных из сердца цыпленка. Опыт был остановлен, потому что автор был уверен, что клетки можно культивировать вечно. Эти результаты убедительно демонстрировали, что старение не является отражением процессов, проходящих на клеточном уровне. [c.599]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология