Кребса—Рингера раствор

Растворы Рингера (в модификации Кребса) для млекопитающих Состав указан в объемных долях. См. замечания к таблице. [c.373]

Серия А. После декапитации крысы печень быстро охлаждали и освобождали от крови перфузией охлажденным раствором фосфата по Кребс-Рингеру, после чего из нее приготовляли срезы. Инкубацию срезов производили в аэробных условиях в аппарате Варбурга. Каждый сосудик содержал по 5,0 мл фосфата Кребс-Рингера, pH 7,4, 50 мг глюкозы (или фруктозы) и 0,5 г срезов. Непосредственно перед началом инкубации в каждый сосудик добавляли 0,1 мл раствора 5 -метионина (25 000 имп/мин). Срезы инкубировали 3 часа при 37° газовая среда — воздух. По окончании инкубации определяли удельную активность белка срезов описанным выше способом. [c.192]

В-раствор I Рингера в модификации Кребса [ВВА 4, 249 (1950)]. Концентрация электролитов и органических кислот, как в сыворотке млекопитающих, и содержит внутренний субстрат. [c.373]

Г-раствор II Рингера в модификации Кребса. Низкая концентрация бикарбоната, Са отсутствует [ВВА 4, 249 (1950)]. Пригоден для измерения продукции СО, путем прямого поглощения СО,. Полезен для культивирования измельченных тканей и гомогенатов, так как более высокая и равномерная скорость дыхания достигается в средах, не содержащих Са. Концентрация фосфата в 20 раз выше, а бикарбоната в 10 раз ниже, чем физиологическая. [c.373]

Д-раствор III Рингера в модификации Кребса. Низкое содержание фосфата, бикарбоната и Oj. Пригоден для измерения продукции СО, путем прямого поглощения СО,. Концентрация Са вдвое выше, чем концентрация ионизованного Са в сыворотке. Ограниченная буферная емкость. [c.373]

Животное убивают (крысу —декапитацией, кролика—воздушной эмболией), быстро извлекают печень, осушают фильтровальной бумагой после промывания дистиллированной водой, помещают в чашку Петри, наполненную льдом или снегом, тонким бритвенным лезвием приготовляют срезы толщиной 0,3— —0,5 мм, берут нужную навеску на торзионных весах и переносят срезы в газовый сосуд Кребса, в который перед этим были внесены 6 мл рингер-бикарбоната и 1 мл раствора хлористого аммония (4,28 мг). Затем пропускают через сосуд в течение 8— —10 минут кислород (из газометра), помещают в водяную ба- [c.545]

Ретикулоциты (незрелые эритроциты) содержат митохондрии, способные как к аэробному, так и к анаэробному окислению глюкозы. В опыте, в котором эти клетки инкубировались в оксигенированном растворе Кребса — Рингера с 10 мМ глюкозы, добавление антимицина А приводило через 15 мин к изменениям концентрации метаболитов, указанным в таблице . [c.518]

Растворы для приготовления растворов Растворы Рингера (А -Д) и обогащенная сыворотка (Е) по Кребсу Рингера (все приблизительно изотоничны [c.373]

Клетки вместе с частью глии осторожно отделяют от среза, вводя под клетку заостренную проволочку из нержавеющей стали ( М1сгоШа1 Г., АВ КапЛа , Халлстахаммер, Швеция) диаметром 18—20 мкм. Каладую клетку извлекают из тканевого среза и помещают в раствор Кребса — Рингера. Эти манипуляции производят вручную, поэтому стереомикроскоп должен быть снабжен упорами для рук. [c.278]

Такие клетки помещают в ионный раствор, не содержащий субстрата, в течение 2 ч в них микроманометрически измеряют поглощение кислорода [3]. В это время скорость поглощения кислорода, выражаемая в мкл Ог -10 на клетку, была близка к нулю. После добавления глюкозы или р-оксибутирата, дыхание немедленно восстанавливается и в течение 10 мин достигает 10 мкл Ог-Ю на клетку, сухой вес клеток равен 2-10 г. Выделенные нервные клетки сохраняют также способность к фосфо-рилированию [14]. Далее выделенные клетки помещали в раствор Кребса—Рингера с добавками бикарбоната и глюкозы. Затем в них под визуальным контролем вводили микроэлектроды и измерялись мембранные потенциалы [15]. Средний мембранный потенциал 120 клеток при 23 °С достигал 40 мВ. В атмосфере, содержащей 95% N2 и 5% СО2, мембранные потенциалы падали до 20 мВ. При замене азота атмосферы на кислород (95% О2 и 5% СО2) мембранный потенциал вновь возрастал. [c.280]

Оптимальной, на наш взгляд, схемой получения устойчивых к Са + дифференцированных клеток сердца является разработка Нага и соавторов [19], учитывающая преимущества более ранних методик. Извлеченное сердце гепаринизированной перед забоем (1000 ед гепарина на 1 кг массы) крысы (200—300 г) помещают в 10 мл охлажденного до О °С бескальциевого физиологического раствора Кребса—Рингера (РКР) на фосфатном буфере, pH 7.4, содержащем 5 10 М глюкозы и 1 % бычьего сывороточного альбумина. Перфузионный аппарат наполняют 50 мл бескальциевого РКР, предварительно оксигенированного продуванием смесью 95 % Ог и 5 % СО2. Через аорту (извлекая сердце, сохраняют ее участок длиной около 5 мм) вводят канюлю и промывают сердце РКР в течение 15 мин при 37 °С (на эту процедуру обычно расходуется около 25 мл физиологического раствора) при этом сердце часто сохраняет.сократительную активность. Перфузию продолжают оксигенированным РКР, содержащим 0.1 % коллагеназы, 0.1 % гиалуронидазы и 1 % бычьего сывороточного альбумина (к этому времени сокращения миокарда прекращаются). После окончания перфузии размягченную и потерявшую упругость ткань разрезают на 4 кусочка, удалив предсердия и крупные сосуды, затем повторно по 10— 15 мин до 3—4 раз инкубируют в растворе ферментов в РКР, отделяя клетки легким встряхиванием. Полученные фракции объединяют и отмывают центрифугированием (3—5 мин при 37 °С, 800 об/мин) на настольной центрифуге. Сходная методика получения изолированных клеток для культивирования описана Клэйкомом и Лэнсо-ном [14]. [c.292]

Техника применения срезов тканей животных для исследова- ния метаболизма манометрическим методом бьша введена Варбур- гом около 50 лет назад,. Она основывается на допущении, что в срезе протекают те же реакции, что и в целом органе. В некоторых случаях такое допущение спорно. В срезе не сохраняется ни иннервации, ни кровоснабжения, а газообмен ограничивается диффузией. Вполне вероятно поэтому, что в толще среза клетки находятся в анаэробных условиях, в то время как клетки поверхностных слоев подвергаются воздействию токсических концентраций кислорода, поскольку обычно в таких экспериментах инкубацию проводит в атмосфере, на 95% насыщенной кислородом. Кроме того, может сказываться отсутствие некоторых белков и гормонов, обычно содержащихся в крови и влияющих на проницаемость клеток in vivo. Как следствие этого некоторые субстраты, возможно, не смогут проникнуть внутрь клеток тканевого среза. Несмотря на все эти ограничения, данный метод оказался необычайно полезным. Ряд перечисленных выше трудностей преодолевают, приготавливая очень тонкие срезы одинаковой толщины (0,2 мм) и помещая их в соответствующую среду. Обычно это растворы Кребса—Рингера которые по своему ионному составу приближаются к сыворотке крови млекопитающих, что позволяет сохранять целостность исследуемых клеток (разд. 1.7). [c.254]

Замечания к таблице. А и Б - исходные бикарбонатный (А) и фосфатный (Б) растворы Рингера в модификациях Кребса и Хенселейта [ZP 210, 33 (1932) 217, 193 (1933)]. Концентрация ионов СР на 20% выше, чем в сыворотке млекопитающих. [c.373]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология