Анализ стерилизованных материало

Механизм стерилизующей фильтрации. Хотя, как правило, мы считаем, что окончательный мембранный фильтр является абсолютным, т. е. способным извлекать все частицы, размеры которых превышают размер его пор, в действительности в нем всегда есть некоторая доля пор, имеющих большие размеры по сравнению с теми, которые указываются в технической документации, и пропускающих сквозь себя бактерии [118]. Как убедительно показал Воллхаусер [232], любой стандартный материал, из которого изготавливаются мембранные фильтры, может пропускать несколько микроорганизмов при определенных условиях и в некоторых пределах. Эти микроорганизмы можно обнаружить, если через мембрану пропустить достаточно большой объем жидкости и весь фильтрат подвергнуть анализу на присутствие в нем жизнеспособных микроорганизмов. Если в исходной смеси, подлежащей фильтрации, содержится небольшое количество микроорганизмов, то те редкие из них, которые попадут в фильтрат, не оказывают значительного влияния на качество стерилизации. Воллхаусер подчеркивает, что отделение бактерий фильтрацией является не методом стерилизации, z представляет собой асептическую процедуру. Таким образом, крайне важно,- чтобы в фильтруемой жидкости было как можно меньше бактерий. Поэтому множество проблем может быть снято, если исходный материал перед стерилизующей фильтрацией будет осветлен. [c.179]

Ход анализа. Одновременно с анализом экстракта испытуемой пробы проводят анализ различных количеств стандартного раствора L-лизина гидрохлорида, чтобы получить данные для калибровочной кривой. Для приготовления стандартной шкалы берут 15 пробирок. Каждый анализ делают в трех повторностях. В первые три пробирки вливают по 5 мл воды, во вторые — по 1 мл раствора лизина (10 мкг/мл) и по 4 мл воды, в третьи — по 2 мл раствора лизина и по 3 мл воды, в четвертые — по 3 мл раствора лизина и по 2 мл воды и в пятые — по 4 мл раствора лизина и по 1 мл воды. Во все пробирки вливают по 5 мл основной среды. Таким же образом вместо стандартного раствора лизина разливают экстракт испытуемой пробы. Все пробирки закрывают ватными пробками и стерилизуют в автоклаве в течение 20 мин. Затем пробирки охлаждают на воздухе, в каждую вносят по 1 капле посевного материала, закрывают пробками и ставят в термостат при 37°С. Через 24 ч выращивание бактерий [c.222]

Перед засевом среды из ферментера отбирают пробы для определения pH, стерильности и для биохимических анализов. Среду ферментера засевают мицелиальной культурой из посевных аппаратов в количестве 4—8% от объема среды. При разности избыточных давлений в ферментере (0,2—0,3 ат) и иноку-ляторе (1—1,5 ат) содержимое посевного аппарата выдавливается сжатым воздухом по посевной линии в ферментер. Посевную линию предварительно стерилизуют паром не менее 1 ч. Продолжительность посева 20 мин. После посева остаток посевного материала из линии вытесняется паром в конденсатную линию. В перерывах между посевами посевная линия находится под паром. Периодически, не реже одного раза в месяц, посевную линию проверяют и опрессовывают так же, как коммуникации подачи среды (стр. 75). [c.77]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология