Изатин обнаружение аминокислот

Положение веществ на хроматограммах определяют после их обработки какими-либо реактивами, дающими цветные реакции с изучаемыми соединениями. Для обнаружения органических кислот используют различные индикаторы, для большинства сахаров — аммиачный нитрат серебра, для аминокислот — растворы нингидрина или изатина. После обработки бумаги теми или иными реактивами на хроматограмме появляются окрашенные пятна соответствующих соединений. [c.32]

Дженкинсон и Тинслей [19] идентифицировали с помощью хроматографии на бумаге состав аминокислот, гидролизат которых был получен в ходе изучения аминокислот растительного происхождения, выделенных из компоста. Десять мл гидролизата, содержавшего приблизительно 1 мг связанного азота, запаривали досуха при пониженном давлении, растворяли в 5 мл воды и снова упаривали досуха. Остаток растворяли в 1,5 мл воды и центрифугировали. Осветвленную жидкость в количестве 0,04 мл наносили на бумагу Ватман № 1. Разделение проводили элюентом, предложенным Вольфом [20]. Хроматограмму проявляли, окуная лист в 0,2%-ный раствор нингидрина в ацетоне. Были идентифицированы следующие аминокислоты цистеиновая, аспарагиновая, глутаминовая, лизин, аргинин, глицин, гистидин, серии, аланин, тирозин, пролин, валин, треонин, изолейцин, лейцин и фенилаланин. Метионин не поддавался определению, поскольку его трудно было отделить от глицина в описанных системах растворителей. Метио-нин-5-оксид тоже не отделялся от валина. Хроматограммы опускали в 0,1%-ный раствор изатина в ацетоне для обнаружения про-лина и подтверждения отсутствия оксипролина. Детектирование и определение содержания пептида с остатком лизина в середине цепи проводили с помощью 2,4-динитрофторбензола [21]. Эта реакция протекает, поскольку е-аминогруппа, в отличие от а-амино-группы лизина, свободна и может вступать в реакцию. [c.306]

Ацетат цинка и изатин растворяют в изопропаноле, нагревая смесь в водяной бане при 80° после этого реактив следует хранить на холоду. После опрыскивания хроматограммы одним из указанных реактивов бумагу прогревают при 80—85° в течение 30 мин. Избыток изатина можно быстро отмыть водой. Реактиве пиридином дает с аминокислотами разнообразное окрашивание (табл. 2), но с кислым реактивом окрашивание бывает более интенсивным (чувствительность для пролина — 3-15 молъ1см ). 0,2%-ный раствор изатина в н-пропаноле был использован для обнаружения пролинсодер-жащих пептидов, в которых остаток пролина несет свободную имино-группу (Монье и Ютис [33]). [c.25]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология