Расщепление по остатку пролина

Вместо полистирольного полимера в качестве основы для создания адсорбента использовали и силикагель (94), к которому ковалентно привязан остаток пролина или гидроксипролина. На таком хираль-ном адсорбенте через комплексы с медью также расщепляли рацематы аминокислот. Сходный метод описан в работе [67], где расщепление проведено в варианте тонкослойной хроматографии на стандартных пластинках, пропитанных медным комплексом Л/.Л/ -ди-н-пропил- -ала-нина. [c.65]

Такой принцип расщепления рацематов—лигандообменная хроматография— впервые был применен с использованием полистирольного сорбента, ковалентно связанного с остатками оптически активной природной аминокислоты Ь-пролина. Сорбент прочно координировал двухвалентную медь, оставляя в ее основной координационной плоскости две вакантные позиции для связывания подвижного лиганда молекулы L- или -аминокислоты. Оказалось, что остаток Ь-пролина проявляет настолько высокое сродство к О-изомерам аминокислот, что последние пришлось даже вымывать из колонки раствором аммиака, который, координируясь с ионами меди, вытеснял подвижный лиганд из сорбционного комплекса, в то время как Ь-изомеры десорбировались водой. [c.82]

Пролин и оксипролин полностью устойчивы к действию фермента.- Цистеин в продуктах расщепления не был обнаружен. Полуцистин, если он присутствует в продуктах расщепления, мог образоваться за счет разрыва пептидной связи при этом связь с полипептидной цепью дисульфидным мостиком сохраняется. Окисление остатков цистина в цистеиновую кислоту не должно давать способную отщепляться под действием карбоксипептидазы группу, так как она содержит заряженную боковую цепь, но восстановление и алкилирование до --S H2 ONH2-rpynn приводят к образованию нейтрального остатка. Такой остаток был недавно обнаружен [198] в гидроЛизатах, полученных при действии карбоксипептидазы на восстановленный и алкилированный пролактин, что свидетельствует о присутствия С-концевого полуцисти нового остатка. [c.233]

Трипсин количественно гидролизовал связь Аг -УаР, а химотрипсин — связь Туг -Уа1 . Карбоксипептидаза отщепила только С-концевой остаток фенилаланина, а лейцинаминопептидаза (свободная от пролидазы) — первые пять аминокислот. В пользу ь-конфигурации пролина говорил как общий план синтеза, так и легкое расщепление связи Рго-РЬе. Конфигурация остатка гистидина в положении 6 установлена путем гидролиза химотрипсином, разделения образовавшейся смеси противоточным распределением, выделения С-концевого тетрапептида Н-Уа1-Н15-Рго-Р11е-ОН и его кислотного гидролиза. Пространственные препятствия, обусловленные наличием остатка валина (ср. [2253]), являлись причиной того, что гидролиз проходил до конца лишь в жестких условиях (64 час, 105° или 24 час, 115°К вследствие чего свободные аминокислоты подвергались частичной рацемизации. Степень рацемизации определена сравнением со смесью эквимолярного количества аминокислот, составляющих данный пептид. Как оказалось, присутствующий в смеси гистидин в условиях гидролиза рацемизуется на 8—10%. Путем разложения оксидазой ь-аминокислот установлено, что с учетом этого количества рацемата весь гистидин присутствует в ь-фор-ме. Таким образом, доказано, что синтетический пептид является а11-ь-соединением. [c.404]

Ферментативный метод заключается в использовании нанкреатиче их карбоксипептидаз. Карбоксипептидаза А отщепляет от белка или пептида только тот остаток, который несет свободную а-карбоксильную группу. По аналогии с методом, в основу которого положено расщепление белка аминопепти-дазой (разд. 6.1.2.1), информацию, касающуюся СООН-концевой последовательности, можно получить с помощью измерения скорости отщепления каждого следующего остатка например, в белке с последовательностью-NH2—A-B- -D. .. W-X-Y-Z—СООН при заданном времени гидролиза количество отщепленного Z всегда больше, чем У, и т. д. Карбоксипептидаза А малоактивна или неактивна вовсе к СООН-концевым остаткам пролина, аргинина или лизина. Карбоксипептидаза В в отличие от карбоксипептидазы А отщепляет СООН-концевые остатки лизина и аргинина (табл. 6.3). [c.177]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология