Динитро фторбензол, реакции с белками

Первый вопрос решался с помощью радиоактивно меченных аминокислот. Существенно то, что нам известно концевое звено цепи гемоглобина, содержащее КН2-группу, — это валин. Опыт ставился следующим образом препарат отмытых рибосом (большая часть, свьппе 80%, имеет константу седиментации 70 э) подвергался инкубации на среде с набором аминокислот и меченным С валином. Синтез шел сравнительно короткое время, что доказывает кинетический характер эксперимента. После извлечения синтезированного рибосомами белка у последнего определялась общая радиоактивность и активность N-кoнцeвoй аминокислоты путем реакции концевой аминогруппы с динитро-фторбензолом или фенилизотиоцианатом, отщепления меченой концевой группы и ее хроматографической очистки. Молекула гемоглобина (кролика) состоит из 670 аминокислотных звеньев, из которых 46 являются валинами, в том числе 4 валина — КНа-концевой группы (в молекуле гемоглобина содержится [c.453]

Для обнаружения белков после электрофореза можнО также применять хорошо известную реакцию белков с 2,4-динитро-фторбензолом [200, 1154]. Гели погружали в 2,5%-ный раствор . 2,4-динитрофторбензола, выдерживали их в течение 16 ч в темноте и затем многократно промывали эфиром, подкисленным НС1. Чувствительность обнаружения БСА этим методом была почти такой же, как и при использовании амидового черного 10 В. Окрашенные 2,4-динитрофторбензолом белки, присутствующие в вырезанных зонах, можно прямо подвергать гидролизу для определения N-концевой аминокислоты, что позволяет получить представление о чистоте разделенных белков. [c.275]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология