Антитела пепсиновые фрагменты

Из пепсиновых фрагментов, приготовленных по описанной методике,можно получить моновалентные Fab -фрагменты антител путем восстановления и алкилирования. Для этого препарат F(ab )2 диализуют против 0,1 М нагрий-ацетатного буфера с pH 5,0, а затем добавляют восстановитель, например меркапто-этаноламин-НС1 или дитиотреитол до конечной концентрации 0,01—0,015 М. Смесь инкубируют в закрытых пробирках на водяной бане при 37°С в течение 1—2 ч, а затем реакцию останавливают, добавив иодацетамид до конечной концентрации [c.168]

Чтобы избежать нежелательного окрашивания, Уинчестер и его сотрудники предложили при работе с лимфоидными клетками использовать во всех вариантах метода иммунофлуоресцен-ции пепсиновые фрагменты антител. [c.176]

При ферментолизе иммуноглобулинов разных видов животных выход пепсиновых F(ab )2-фрагментов может быть различным. При указанных выше значениях pH кроличий иммуноглобулин полностью расщепляется до Р(аЬ )г, тогда как иммуноглобулин барана более устойчив к пепсину даже при снижении pH до 3,9. У мышей в отличие от других животных разные подклассы иммуноглобулинов сильно различаются по чувствительности к пепсину, по крайней мере в случае очищенных миеломных белков (L. Forni, неопубликованные наблюдения). По этой причине может быть очень низким не только общий выход F(ab )2-фрагментов, но и выход фрагментов какого-то определенного подкласса. А это весьма нежелательно, если, как часто бывает, специфическая активность антител неравномерно распределена между подклассами IgG. [c.168]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология