Второй фермент в качестве метки

Основные кинетические закономерности протекания ферментативных реакций. В иммуноферментных методах анализа в качестве метки антигенов и антител могут использоваться как ферменты, так и их субстраты. Если меткой служит молекула фермента, то выбранный способ детекции должен обеспечивать регистрацию сигнала, пропорционально зависимого от концентрации (количества) фермента, а в случае применения в качестве метки субстрата — концентрации (количества) субстрата. В первом случае фермент выполняет роль маркера (он ковалентно связан с молекулой антигена или антитела), во втором — детектора (свободный фермент). Оптимизация условий каталитической реакции (выбор pH, оптимальных концентраций фермента и субстратов) осуществляется в соответствии с используемой модификацией ИФА. [c.61]

Второй фермент в качестве метки [c.117]

Структура. Продажными препаратами щелочной фосфатазы являются фермент из кишечника телят и из Е. соЫ. В качестве метки в иммуноферментном анализе обычно используют первый из них, так как он обладает более высокой удельной каталитической активностью. Молекула щелдчной фосфатазы представляет собой димер с 100 ООО. В состав каждой из субъединиц входят два сильно связанных атома цинка, один из которых существен для поддержания структурной целостности молекулы, а второй входит в состав активного центра и принимает участие в каталитическом аКте. [c.73]

Для определения АГ использование АТ, конъюгированных с флуоресцентной или ферментной меткой, — часто в качестве второго антиглобулино-вого реагента — для окрашивания клеток и тканей. В случае применения фермента необходим нераство римый, окрашенный субстрат Для изучения и разделения клеточных популяций [c.29]

Ни пептид S-Tag, ни 103-звенный полипептид, используемый в качестве аффинного сорбента, не обладают ферментативной активностью, однако после образования комплекса в последнем индуцируется рибонуклеазная активность. Это позволяет количественно оценивать эффективность исследуемых систем экспрессии. Однако епде большей чувствительностью и удобством в применении обладают системы, в которых S-белок ковалентно связан с флуоресцентными красителями или ферментами (например, с классической пероксидазой хрена). Такую систему можно эффективно использовать для идентификации рекомбинантного белка с помопдью вестерн-блоттинга и ее часто применяют одновременно со второй аффинной меткой. [c.130]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология