Электрофорез в ПААГ нативного белка в градиенте ПОРИСТОСТИ геля

Преимущества электрофореза в градиенте пористости (концентрации) ПААГ были отмечены в предыдущем разделе при обсуждении фракционирования белков. По-видимому, нет оснований предполагать, что эти преимущества не будут ощутимы и при фракционировании нуклеиновых кислот. Вероятно, лучших результатов можно ожидать в денатурирующих гелях, поскольку гибкость нитей нативных нуклеиновых кислот в обычных гелях может смазывать эффект торможения полос при уменьшении размера пор. [c.142]

Электрофорез в ПААГ нативного белка в градиенте пористости геля Электрофорез проводят в блоках полиакриламидного геля размером 110x100x1 мм (Anderson et al., 1972) (Рис. 16). [c.58]

Указанные преимущества объясняют растущую популярность градиентных гелей, несмотря на большую сложность их приготовления по сравнению с обычным ПААГ. Легко понять, почему такая ведущая фирма, как Pharma ia , специализировалась на выпуске стандартизированных градиентных ПААГ. Фирма предлагает гели в виде пластин с рабочими размерами 78X78X2,7 мм для двух интервалов концентраций. ПААГ 2— 16% и 4—30% (РАА 2/16 и РАА 4/30). Профиль градиента пористости в этих пластинах подобран так, что в пределах некоторого диапазона молекулярных масс нативных глобулярных белков они обеспечивают линейную зависимость расстояния миграции белка (до конечного положения) от логарифма его молекулярной массы. Калибровочные данные прилагаются фирмой к каждому гелю вместе с указанием стандартных условий фракционирования. Рабочие диапазоны молекулярных масс таковы для РАА 2/16 —от 100 тыс. до 5 млн. дальтон, для РАА 4/30 —от 50 тыс. до 2 млн. Для РАА 4/30, например, это означает, что при достаточно длительном электрофорезе белки с молекулярной массой менее 50 тыс. могут выйти из геля, а имеющие массу более 2 млн. — не войдут в него. Последняя цифра может относиться, конечно, только к белковым комплексам или нуклеиновым кислотам. [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология