Профиль градиента

Профиль, показанный на рис. 17, был определен благодаря анализу, проводившемуся с помощью газовой хроматографии. Исследовалось содержание растворителя на полосках фольги, покрытых слоем силикагеля. Элюирование с таких тонкослойных пластинок проводили в ненасыщенных сэндвич-камерах без предварительного насыщения сухого слоя, если не считать нескольких миллиметров в области видимого фронта (такая область отчетливо обозначена на рисунке). При пользовании данными пластинками, изготовленными с употреблением фольги, не наблюдаются различия профилей градиента при элюировании в горизонтальной и вертикальной плоскостях. Когда элюирование проводили с двухчасовой передержкой, кривизна, обусловленная фронтальным градиентом, устранялась, слой сорбента оказывался равномерно насыщенным и отмечалось общее увеличение концентрации растворителя в слое на 6%. Последствием такой выдержки пластинки являлось то, что (если даже не учитывать повышенное насыщение всей поверхности) большее количество растворителя (в 1.8 раза) проникало в слой для сглаживания фронтального градиента (4й=1-08 см. уравнение 41а). [c.69]

На рис. 59 показаны некоторые из таких воздействии на градиент, отмечаемый в круговой бумажной хроматографии, а на рис. 62 иллюстрируются некоторые ситуации, отмечаемые в круговой (центробежной) тонкослойной хроматографии при работе с и-камерами. Как и предполагалось, количество растворителя в слое снижается при увеличении расстояния от центра пластинки. Создается типичный "антипараллельный градиент" (см. соответствующую главу), сжимающий пятна таким образом, что они преобразуются в эллипс. Профиль градиента оказывается довольно пологим при наибольщей скорости поступления растворителя в слой (порядка 1 мкл/с), но приобретает увеличивающуюся крутизну прн снижении скорости потока (показанный на рис. 62.а). Кривая, соответствующая скорости 1 мкл/с (показанная на рис. 62.6), представляет собой специальный случай (когда профиль идеально полог и находится на одном уровне) аналогичный график, приведенный на рис. 62.а, скошен вниз. Такое существенное различие объясняется тем, что эксперименты в случае а проводились при относительной влажности около 45%, а в случае б - 90%. При такой высокой влажности слоем улавливается столь много воды, что она частично вытесняется движущимся фронтом гидрофильного ацетона (в результате вода движется в виде бесцветного кольца впереди фронта растворителя). Поскольку вода перемещается по слою медленнее ацетона, следующий за ней растворитель замедляется кольцом воды, в результате чего объемный градиент выравнивается (см. также рис. 19). [c.166]

Формирование профиля градиента в ходе элюирования при центростремительно. 1 режиме. [c.171]

Основная система со смесительной емкостью показана на рис. 5.7. Изменение профиля градиента можно произвести как за счет изменения начального объема [c.101]

На рис. 5.8 приведены виды профилей градиентов концентрации, которые можно получить при использовании устройств такого типа. В общем случае подобную систему применяют вместе с насосом с возвратно-посту-пательным ходом поршня, аналогичным тому, который показан на рис. 5.5. Поток высококонцентрированного [c.103]

Рис. 9.6. Суммарная кривая профиля градиента для 9-камерной системы, в

Имеется много устройств, различающихся в соответствии с типом установленных насосов. Системы с насосами с постоянно толкающим поршнем для образования градиента при высоком давлении требуют применения двух насосов и потому очень дороги. Однако они позволяют создавать градиенты почти любого вида и направления, так как работа приводов их насосов (шаговых моторов) регулируется электрически. Пневматические насосы можно применять лишь тогда, когда смешивание для образования градиента проводят при высоком давлении. Обычно программатор градиента управляет двумя автоматическими клапанами высокого давления с соленоидными приводами для создания экспоненциального или линейного профиля градиента. Можно использовать два насоса или же один (рис. 4.2). Неудобство этой схемы состоит в том, что змеевиковая емкость заполняется растворителем Б периодически. Кроме того, несколько затруднен переход к двум новым растворителям. [c.110]

Тогда можно рассматривать одну поверхность раздела и считать наклон профиля (градиент скорости) постоянным (см. рис. 83, г). [c.152]

Рис. 1.40. Схема профилей градиентов скоростей (/) и скоростей стекания (II) жидкого слоя в зависимости от его толщины для ньютоновской жидкости (а) и тиксотропной системы (б)

Было проведено детальное исследование [122] стекания ньютоновских жидкостей и тиксотропных систем, для которых характерно обратимое восстановление состояния и структуры при уменьшении интенсивности деформирования или прекращении его [122]. На рис. 1.40 представлены схемы зависимости профилей градиентов скоростей и скоростей стекания жидкого слоя по вертикальной стенке от толщины жидкой пленки. Для [c.87]

Чтобы стабилизировать слой клеток, непосредственно под ним создают закругленный профиль градиента, подавая из промежуточного резервуара (Г) 50 мл 0,35%-ного раствора фиколла в результате образуется сглаженный ступенчатый градиент плотности (рис. 2). [c.258]

ПРОФИЛЬ ГРАДИЕНТА САХАРОЗЫ [c.213]

Очень часто пробирки углового ротора заполняют плотным раствором соли не полностью и сверху наслаивают легкое масло. Это делается как для того, чтобы избежать перегрузки ротора на максимальной скорости вращения, так и для того, чтобы исключить из процесса ориентации градиента область пробирки, прилегающую к ее крышке, где плавность этого процесса нарушается. В таком случае все расчеты профиля градиента, естественно, надо вести исходя из значения г ия для границы между плотным раствором соли и маслом. Из чисто геометрических соображений вытекает следующее соотношение [c.255]

При подаче в ротор линейного градиента, т. е. раствора, в котором концентрация сахарозы увеличивается пропорционально объему подаваемой жидкости, в нем создается нелинейный — вогнутый — градиент концентрации сахарозы ( эффект радиального разбавления ). Это легко понять, если мысленно рассмотреть положение внутри зонального ротора двух одинаковых объемов подаваемого линейного градиента сахарозы, из которых один взят из начального, а другой — из конечного участка этого градиента. Каждый из двух одинаковых объемов обусловливает один и тот же прирост концентрации сахарозы (условие линейности подаваемого в ротор градиента). В цилиндрической пробирке бакет-ротора этим одинаковым приростам плотности соответствуют и одинаковые участки длины пробирки, так как сечение ее неизменно. Градиент оказывается линейным по длине, вдоль пути миграции молекул. В зональном же роторе двум оди> наковым объемам соответствуют цилиндрические слои разной толщины большей близ центра и меньщей у его периферии. Это означает, что один и тот же прирост концентрации сахарозы будет растянут во внутренней зоне градиента и сжат вблизи наружной стенки ротора. Иначе говоря, градиент плотности будет характеризоваться увеличением крутизны своего профиля при переходе от внутренней зоны к периферической, т. е. будет вогнутым. В целях получения более близкого к линейному профиля градиента в ротор подают иногда не линейный, а выпуклый (например, экспоненциальный) градиент сахарозы (см. выше). [c.275]

Программное устройство фирмы Waters (модель 660) предусматривает возможность задания любого из 11 фиксированных профилей градиента (линейного, двух ступенчатых и по четыре — выпуклых и вогнутых). Экспериментатору достаточно задать начальный и конечный состав смеси буферов, сумлгарную скорость подачи элюента п время элюции. Существуют варианты п более сложных систем. Например, в хроматографе фирмы Руе Uni am (модель PU 4800) задание формы градиента с помощью микропроцессора можио осуществить путем разбиения всего времени элюции на девять произвольных интервалов, внутри каждого из которых любую кривую можно аппроксимировать экспоненциальной функцией. Однако необходимость столь сложных (и дорогостоящих) устройств представляется сомнительной, по крайней мере для решения тех задач, которым посвящена эта книга. [c.100]

Изменение подвижной фазы pH процент органического модификатора концентрация буферного раствора концешрация добавок (ион-парпого реагента) профиль градиента Ко юнка неуравновешенна [c.493]

С некоторой ошибкой можно все же определить нужный момент "перепержки", если дожидаться, пока весь слой не станет равномерно полупрозрачным. Конечно, слой за намеченным уровнем необходимо предварительно удалить. Иначе молекулы подвижной фазы будут попадать (через газовую фазу) в эту зону, в результате чего величина коэффициента окажется искусственно завышенной. При "передержке" пластинки может наблюдаться повышение концентрации растворителя по всей площади пластинки (как показано на рнс. 17). Однако точное определение значений коэффициента оказывается довольно сложным и длительным, а потому практически нецелесообразным. Оцен1 а точного профиля градиента возможна, когда применяется специальный краситель с Кг=1. Если не считать возможности введения поправки с помощью параметра Кс (см. ниже), не существует способа точного и относительно удобного учета значений Кг для веществ, движущихся в зоне фронтального градиента (т.е. прн Кг >0.8). [c.159]

Конечно, все сказанное справедливо только для случая, когда поток прекращается при достижении центра фронтом раствор1ггеля (т.е. когда не производится отбор растворителя из центра). При этн.х условиях растворитель даже затопляет зону, характеризующуюся значениями К =0,8. в результате чего регистрируется большой пик в центре с некоторой степенью количественной недостоверности. Необходи.мо дальнейшее исследование факторов, влияющих на точный профиль градиента в двух круговых режимах. Описание достоинств и недостатков круговой тонкослойной. хро.матографии, которые приходится учитывать прн выборе соответствующего. метода разделения, можно найти в разд. 2 ("Разделение") настоящей главы. [c.170]

Другая коммерчески доступная установка для получения градиента схематически показана на рис, 4.13. Электронное устройство контролирует вычерчиваемый профиль градиента и дает инструкцию относительно его изменения. Одновременно контролируют концентрацию вымываемого вещества в элюате. Если концентрация вымываемого вещества превышает предварительно выбранную величину, устройство сохраняет постоянный состав элюирующег раствора. Если концентрация вещества становится ниже установленного предела, устройство автоматически регулирует градиент элюируюшего раствора в соответствии с предварительно выбранной величиной. [c.139]

При фонтанировании общий перепад давления в слое складывается из двух сопротивлений, а именно сопротивления фонтана, в котором транспортируются частицы в потоке легкой фазы, и сопротивления кольца, движущегося вниз плотным слоем противоточно газу. Поскольку газ, входя через основание, по мере подъема распространяется радиально из центральной зоны в кольцеобразный слой, продольный градиент давления увеличивается от нуля у основания до максимума на верху слоя. Сле-доваФельно, общий перепад давления по слою может быть получен интегрированием продольного профиля градиента давления по высоте слоя. Так как градиент давления для минимального псевдоожижения [c.35]

В этой системе скорость потока высококонцентриро ванного раствора в камеру для создания градиента задается соответствующим насосом. Поэтому профиль градиента концентрации можно варьировать, изменяя в соответствии с уравнением (5.3) соотношение скоростей потоков, подаваемых соответствующими насосами через колонку и камеру для создания градиента концентрации. [c.103]

Учетом неньютоновского характера профиля градиентов скорости вышеприведенные зависимости отличаются от зависимостей, включаюших коэффициент ньютоновской вязкости. [c.58]

Ионообменную хроматографию белков [20] выполняют на ионообменниках, имеющих гидрофильную матрицу, например на целлюлозе и декстране. Анионообменники, особенно ОЕАЕ-целлюлозу и ОЕАЕ-сефадекс, используют чаще, чем катионооб-менники типа СМ-целлюлозы. Ионообменники на основе целлюлозы имеют открытую сетчатую структуру с ионизованными центрами, легкодоступными для белков. Число ионных связей, образующихся между обменником и белком, зависит не только от используемого материала, но также в большой степени от pH и ионной силы буфера. Эти ионные пары постоянно диссоциируют и образуются вновь, так как ионы элюента конкурируют за центры обмена. Обменники, пригодные для фракционирования белков, имеют низкую плотность зарядов, поэтому число ионных связей между ионитом и отдельными молекулами белка не столь велико, чтобы вообще воспрепятствовать продвижению последних вдоль колонки. Хотя ионные связи постоянно диссоциируют и образуются вновь, в начале хроматографирования белок связывается с ионообменником и не элюируется с колонки. Однако когда концентрация небольших конкурирующих ионов буфера возрастает до такого уровня, что все связи одновременно разрываются, белок начинает двигаться вниз по колонке. Если в процессе разделения используют градиент ионной силы, белок, перемещающийся в стартовой зоне медленнее, чем буфер, элюируется им при увеличении концентрации ионов. Таким образом, элюирующая способность буферного раствора постоянно увеличивается и макромолекула перемещается все быстрее и быстрее. Скорость ее перемещения становится сравнимой со скоростью движения жидкости, когда в элюенте достигается такая концентрация соли, которая эффективно препятствует взаимодействию молекулы белка с обменником. Важное значение в каждом отдельном случае имеет профиль градиента чтобы увеличить разрешение пиков в определенных участках хроматограммы, используемый градиент должен быть сравнительно пологим, но в то же время достаточно крутым в других участках, чтобы избежать уширения пиков. [c.108]

Важны также размеры камеры-смееителя. Она должна нметь объем 1—2 мл, чтобы через колонку проходил хорошо перемешанный раствор. Однако при этом в системе возникает мертвое Пространство , н в результате профиль градиента на колонке на 1—2 мл отстает от профиля градиента, который формируется у клапанов смесителя. Есть и другие источники мертвого пространства — это сам насос, трубки н петля для пробы. Все это необходимо учитывать для определения действительной концентрации, при которой элюируется данный компонент. [c.111]

Указанные преимущества объясняют растущую популярность градиентных гелей, несмотря на большую сложность их приготовления по сравнению с обычным ПААГ. Легко понять, почему такая ведущая фирма, как Pharma ia , специализировалась на выпуске стандартизированных градиентных ПААГ. Фирма предлагает гели в виде пластин с рабочими размерами 78X78X2,7 мм для двух интервалов концентраций. ПААГ 2— 16% и 4—30% (РАА 2/16 и РАА 4/30). Профиль градиента пористости в этих пластинах подобран так, что в пределах некоторого диапазона молекулярных масс нативных глобулярных белков они обеспечивают линейную зависимость расстояния миграции белка (до конечного положения) от логарифма его молекулярной массы. Калибровочные данные прилагаются фирмой к каждому гелю вместе с указанием стандартных условий фракционирования. Рабочие диапазоны молекулярных масс таковы для РАА 2/16 —от 100 тыс. до 5 млн. дальтон, для РАА 4/30 —от 50 тыс. до 2 млн. Для РАА 4/30, например, это означает, что при достаточно длительном электрофорезе белки с молекулярной массой менее 50 тыс. могут выйти из геля, а имеющие массу более 2 млн. — не войдут в него. Последняя цифра может относиться, конечно, только к белковым комплексам или нуклеиновым кислотам. [c.75]

Как же рассчитать константу седиментации, используя результаты эксперимента Эта задача очень упрощается, если профиль градиента плотности таков, что увеличение радиуса компенсируется изменениями плотности и вязкости среды вдоль него, и все частицы движутся с постоянными скоростями, которые определяются только их размерами. Градиенты, отличающиеся такой особенностью, называют изокинетическими . Подчеркнем, что изокинетичность градиента определяется геометрией ротора и распределением концентрации (например, сахарозы) вдоль пробирки. [c.204]

Смотреть страницы где упоминается термин Профиль градиента: [c.44] [c.44] [c.76] [c.107] [c.121] [c.122] [c.139] [c.121] [c.122] [c.121] [c.122] [c.169] [c.56] [c.57] [c.58] [c.294] [c.294] [c.169] [c.174] [c.290] [c.98] [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология