Лиганды ингибирование транскрипции

Тригибридная дрожжевая система (Y3H) является дальнейшим развитием системы Y2H [118,142]. Этот вариант чаще всего используется с целью исследования РНК-белковых взаимодействий. Для активации (или в другой модификации ингибирования) транскрипции гена-репортера в ней задействованы три гибридных макромолекулы два гибридных белка, один из которых содержит DBD-домен, соединенный с универсальным РНК-связы-вающим доменом (в данном примере с белком оболочки фага MS2), и AD-домен, объединенный с белком Y, взаимодействие которого с конкретной последовательностью РНК анализируется (рис. 49, в). Третьим компонентом является гибридная РНК, содержащая универсальную якорную последовательность, взаимодействующую с белком MS2, и последовательность X, способность которой взаимодействовать с белком Y исследуется. В том случае, когда имеет место РНК-белковое взаимодействие, формируется тройной комплекс, активирующий промотор гена-ре-портера. В другом варианте система Y3H может быть использована для изучения взаимодействий белков-рецепторов с низкомолекулярными лигандами, получившими название химических индукторов димеризации ( hemi al indu ers of dimerization - ID) (рис. 49, г). В этом случае в качестве третьего компонента системы используют двойной лиганд L1-L2, у которого часть L1 взаимодействует с белком X, а взаимодействие L2 с белком Y исследуется. (Возможен и обратный вариант, когда изучается взаимодействие L1 с белком X.) При наличии взаимодействия происходит активация (или в других конструкциях подавление) активности гена-репортера. [c.368]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология