Перфузия, фиксация

Быстрой остановки аутолитических процессов можно достичь не только фиксацией на холоду, но и перфузией фиксирующего вещества чер>ез кровеносную систему. Правильно установленное давление перфузии в течение 10— 20 мин обеспечивает равномерную фиксацию клеток и тканей при оптимальной стабилизации структур. Последующая фиксация погружением маленьких кусочков ткани в эту же фиксирующую среду при температуре холодильника на 24 ч позволяет стабилизировать вещества и ферменты на месте их прижизненной локализации. Фиксация перфузией не требует большой затраты времени и считается предпочтительной. [c.34]

При предварительной обработке ткани для гистохимического выявления глюкозо-6-фосфатазы следует обращать внимание на значительную чувствительность фермента к действию фиксатора. Фиксация погружением в холодный формалин или глутаральдегид приводит к значительной инактивации фермента. Наилучшей можно считать непродолжительную фиксацию перфузией глутаральдегидом в низкой концентрации. Поскольку гистохимическое выявление этого фермента проводится при pH 6,5, [c.186]

Комбинируя методы внутриклеточной перфузии, фиксации потенциала и синхронного накопления сигнала, К. Армстронг и Ф. Безанилла обнаружили на гигантском аксоне кальмара малый асимметричный ток смеш ения, связанный предположительно с активацией Ма -каналов. [c.180]

Общим методом подготовки ткани для электронной микроскопии является ее фиксация 2,5%-ным раствором тлутарового альдегида в 0,1 М фосфатном буфере, pH 7,4, в течение 1 ч при комнатной температуре. В некоторых случаях, например у голубей, первичную фиксацию осуществляют путем перфузии фиксатором всего животного. В других случаях, например у пчел, ткань выделяют препарированием и фиксируют погружением в среду. После первичной фиксации ткань извлекают из организма, промывают в буфере в течение 30 мин, а затем дополнительно фиксируют в 1%-ном растворе четырехоксида осмия в фосфатном буфере в течение 1 ч. При аналитической электронной микроскопии обработку осмием не производят. Ткань обезвоживают проволкой через ацетон и заключают в пластмассу Ро1уЬес1 (Ро1у8с1епсе8) или эпон 812. Эпон более предпочтителен для аналитической микроскопии, но он малодоступен в настоящее время. Для обычной микроскопии пригодны любые пластмассы, имеющиеся в продаже. [c.250]

В связи с малой скоростью проникновения глутаральдегида в ткань и во избежание появления зон различной стабилизации подготавливаемые для фиксации кусочки должны быть не толще 2 мм. Наилучшие результаты достигаются с помощью перфузии (10—30 мин) с последующей фиксацией погружением (2—4 ч от О до +4° С). Для лучшего контрастирования и стабилизации материала рекомендуется дофиксация в забуференном 1—2%-ном растворе 0804. [c.38]

Перфузия ДЛЯ промывания кровеносных сосудов изотоническим раствором сульфата натрия, подогретым до температуры тела, а затем для фиксации 10%-ным формалином В изотоническом растворе сульфата натрия (16,2 г безводного Na2S04 на 1 л воды), 1 30 мин. После этого ткань режут на кусочки не толще 1 см и погружают в тот же фиксирующий раствор на 6—18 ч при температуре + 4°С. Промыть в 2—3 сменах дистиллированной воды и поместить в 20%-ный этанол, в котором ткань можно хранить при + 4°С несколько недель без потери активности фермента. Согласно Льюису, такая обработка оптимальна. [c.235]

Фиксация а) фиксация перфузией 3%-ным глутаральдегидом на фосфатном буфере фН 7,6), 15—30 мин, с последующей фиксаирией погружением на 2—4 ч при температуре 2 -4 С б) маленькие кусочки ткани фиксировать [c.236]

Методы перфузии клеток. Применение вне-и внутриклеточных электродов и метода фиксации напряжения особенно целесообразно в исследованиях на перфу- [c.88]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология