Полиэтиленгликоль концентрирование вируса

На первой стадии очистки вирус необходимо отделить от клеток и клеточного дебриса, содержащегося в культуральной жидкости. Как правило, для этого используют низкоскоростное центрифугирование при 600 g. На второй стадии вирус, находящийся в осветленном супернатанте, концентрируют и освобождают от большинства низкомолекулярных и высокомолекулярных примесей с помощью любого из известных методов концентрирования вирусов при низкой температуре (4—10°С), pH 6,8—8,0 и средних значениях ионной силы. Ниже рассматриваются два метода осаждение вируса высокоскоростным центрифугированием и преципитация ацетатом цинка, сульфатом аммония или полиэтиленгликолем. Преципитация удобна для получения вирусов как в малых, так и в больших количествах и обладает тем преимуществом, что обеспечивает отделение вируса от большей части посторонних белков. [c.124]

Суспензию центрифугируют при 3000 g 10 мин для удаления нерастворившегося материала. Данный метод обеспечивает 100%-ный выход вируса, позволяет избежать колебаний pH и достигнуть более высокой степени концентрирования, чем метод с использованием сульфата аммония. Однако осаждение полиэтиленгликолем требует больше времени. [c.58]

Очень прост и эффективен метод концентрации растворов макромолекул при помощи диализа против полиэтилен-гликоля или карбовакса (554, 607). Этот метод основан на способности сухого полиэтиленгликоля впитывать в большом количестве воду и соли. Обычно используют карбовакс с молекулярным весом 4000, 6000, 20 ООО и 40 ООО. Применение карбовакса с более высоким молекулярным весом экономичнее, и он удобнее в обращении, чем поли-винилнирролидон. Метод состоит в следующем [554] Жидкость наливают в диализную трубку Вискинг небольшого диаметра или в диализный мешок и на несколько часов (от 1 до 18) помещают в сухой полиэтиленгликоль. Затем жидкость переносят на несколько часов в дистиллированную воду для диализа. Процедуру можно повторить со свежей порцией карбовакса. Таким образом, объем диа-лизуемой жидкости уменьшается в несколько раз. Для этого можно использовать любое водоотнимающее высокомолекулярное вещество, например сефадекс Г-200 или по-ливинилнирролидон с мол. весом 10 ООО и выше. Недостатком этого метода является продолжительность процедуры, что, конечно, невыгодно для концентрирования лабильных вирусов [377], [c.95]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология