Прямое выявление мутантов

ПРЯМОЕ ВЫЯВЛЕНИЕ МУТАНТОВ [c.28]

Одна из основных трудностей при прямом отборе состоит в выборе оптимальной концентрации селективного агента. Например, при отборе мутантов, устойчивых к различным антибиотикам, важно подобрать такую концентрацию антибиотика, которая полностью блокировала бы рост бактерий дикого типа, но в то же время позволяла бы развиваться устойчивым мутантам. Определение оптимальной концентрации методом проб п ошибок может потребовать много времени и сил. В первом примере, приведенном ниже, описан простой метод создания градиента концентрации какого-либо агента в чашке, который можно модифицировать для выявления различных типов мутантов, упоминавшихся выше. Во втором примере описывается простой метод бумажных дисков, используемый для индукции и прямого отбора ревертантов ауксотрофных мутантов. [c.29]

В целом два этих метода оказались весьма мощным средством анализа жгутиковых мутантов. У большинства мутантов, включая с их помощью было выявлено прямое влияние мутаций на процесс сборки (т.е. показано, что мутантные гены кодируют белки, образующие часть структуры аксонемы). Более того, оба этих метода давали одинаковые результаты при выявлении белка, кодируемого поврежденным геном немеченое пятно при анализе дикариона соответствовало смещенному пятну при анализе ревертантов. [c.445]

Большинство мутантных типов нельзя выявить методами прямого отбора, описанными в предыдущем разделе. Для любой мутации, связанной с потерей генетической функции, требуются такие методы выявления, которые позволили бы идентифицировать очень редко возникающий тип мутанта на большом фоне немутантных клеток. В эту группу входят ауксотрофные мутанты, мутанты с изменениями в системе сбраживания углеводов, морфологические варианты различных типов и другие условно летальные мутанты. [c.35]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология