Методы окрашивания белков красителями

Методы прямого прижизненного окрашивания различных проб воды, почвы и осадков позволяют выделять гораздо больше живых клеток, чем высевы на различные среды. Большое расхождение в результатах прямого счета в сравнении с высевом на среды поставило вопрос прижизненно окрашенные микроорганизмы являются живыми или мертвыми Применение в качестве прижизненного красителя акридинового оранжевого показало, что часть клеток окрашивается с последующей зеленой флуоресценцией, часть — остается оранжевой. Это привело вначале к неверному выводу о том, что зеленые клетки — живые, а оранжевые — мертвые. Впоследствии было выяснено, что цвет флуоресценции зависит от отношения ДНК/белок в клетке, в результате активно делящиеся клетки выглядят зелеными, а растущие более медленно или покоящиеся клетки дают оранжевую флуоресценцию, оставаясь при этом живыми. [c.245]

Хотя концентрация белков в зонах, разделившихся при ИЭФ в геле, и достигает значительного уровня, он не всегда достаточно высок для обнаружения белков путем их осажлте-ния. Поэтому в большинстве случаев приходится прибегать к более чувствительным методам окрашивания. Для преодоления трудностей, связанных с взаимодействием красителя и амфолина, имеются два пути. Первый путь — это удаление амфолитов-носителей после фиксации, но до окрашивания белков, а второй — подбор таких условий, при которых комплексы краситель — амфолин оказываются менее прочными, чем комплексы краситель — белок. Ниже будут рассмотрены некоторые приемы, позволяющие использовать обе эти возможности. [c.154]

Слабоконцентрированными растворами щелочей, таких, как NaOH, ЫагСОз или КОН, включения постепенно растворяются, последующим окислением можно вновь осадить белок. При окрашивании красителем Гимза по методу Брейндла и Комарека [73] во включениях окрашиваются шаровидные тельца размером 0,1— 0,2 мк. По мере растворения включений окрашивается все меньше и меньше таких шаровидных телец и исчезают светящиеся тельца, видимые во включениях в тени, при фазовом контрастировании [308]. [c.139]

Минибиологи говорят если вы хотите знать, что происходит в клетке, вам следует заглянуть в нее. Так как средняя клетка имеет объем около 1000 мкм (10 м ), а сухой вес около 10 ° г, то методы исследования, как оптические, так и химические, должны быть очень чувствительными . При этом минибиологи используют электронный микроскоп для изучения молекулярного строения, применяют красители, реагирующие со специфическими компонентами клетки и окрашивающие их (белок, ДНК и др.), причем интенсивность окрашивания может количественно характеризовать эти компоненты используют меченые соединения для изучения их синтеза, применяют микрохимические методы для определения концентрации различных ферментов в клетке. [c.71]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология