Флуоресцентная кювета, схема

Рис. 9.5. Схема флуоресцентной кюветы [3].

Впервые генерация излучения на красителе была получена в 1966 г. [48. Общую схему получения спектрально узкого и перестраиваемого по длине волны излучения можно рассмотреть на примере широко распространённого генератора с решёткой в скользящем падении. На кювету, содержащую краситель, направляется сфокусированный луч накачки (рис. 8.2.33). Флуоресцентное излучение красителя проходит через дисперсионные элементы резонатора и возвращается обратно. Однако возвращается только малая часть всего спектра люминесценции красителя, которая определяется углами взаимного расположения кюветы, дифракционной решётки и 100% зеркала. Это излучение усиливается в кювете и снова возвращается в резонатор. В результате многократных проходов всё большая часть люминесценции за счёт индуцированного излучения переходит в лазерное излучение. Так формируется импульс выходного излучения с весьма узкой спектральной шириной. [c.421]

Сильное светорассеяние, обусловленное матрицей, может затруднять измерения. Однако концентрация белков в иммобилизованных ферментах достаточно высокая. Следовательно, оптическая плотность растворов белков в области полос поглощения, как правило, высока. Таким образом, поглощение света эффективно конкурирует со светорассеянием. При возбуждении свет поглощается очень тонким слоем поверхности конъюгата белок — матрица, и поэтому флуоресценцию следует наблюдать с фронтальной части поверхности носителя с иммобилизованным белком. Кро.ме того, поскольку излучение имеет большую длину волны по сравнению с длиной волны при возбуждении,. флуоресценция может быть легко отделена от светорассеяния. Гейбл и др. [26] описали кювету, с помощью которой им удалось методом флуоресценции исследовать конформационные изменения иммобилизованных трипсина и химотрипсина, вызываемые мочевиной, нагреванием или присутствием специфических лигандов. Поскольку эту кювету не всегда можно применять, Барел и Рузенс [3] сконструировали очень простую цилиндрическую флуоресцентную кювету, схема которой показана на рис. 9.5. [c.253]

Фотометрические детекторы. В основе работы одного из наиболее распространенных в ЖХ детекторов лежит измерение поглощения в УФ (или видимой) области. Оптическую систему такого детектора следует тщательно сконструировать, чтобы можно было пропустить достаточное количество лучистой энергии через узкие кюветы, диаметр которых во избежание создания мертвого объема составляет около 1 мм. На рис. 21-8 приведена схема типичного фотометрического детектора. Измерительная ячейка и ячейка сравнения представляют собой цилиндрические каналы, высверленные в блоке из нержавеющей стали или тефлона и закрытые кварцевыми окошками. УФ-излу-чение лампы коллимируется линзой, проходит через каналы и поступает на два фотоэлемента. Обычно источником излучения служит ртутная лампа низкого давления с основной частью излучения при 254 нм. Некоторые модели снабжены флуоресцентным преобразователем, позволяющим получать спектральную полосу с максимумом при 280 нм. Это небольшая кварцевая пластинка, покрытая подходящим люминофором, поглощающим при 254 нм и излучающим при 280 нм. Многие важные классы соединений поглощают при одной из этих длин волн или при обеих. [c.441]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология