Лигирование сшивание РНК

Сшивание ДНК лигазой фага Т4 по липким концам (лигирование) [c.103]

Другой удобный метод - сшивание (лигирование) тупых концов. В его основе лежит способность ДНК-ли-газы фага Т4 сшивать две молекулы ДНК, имеющие тупые концы, то есть молекулы, у которых отсутствуют выступающие одноцепочечные участки. (Эта реакция-дополнительное проявление активности фермента помимо сшивания разорванных связей внутри двухцепочечной молекулы.) Сшивание тупых концов приводит к непосред- [c.240]

Один ИЗ важных этапов конструирования молекулы ДНК — лигирование (или сшивание) генов с помошью фермента ДНК-лигазы. Сшивание фрагментов ДНК, содержащих нужные гены, осуществляют двумя основными методами а) по липким концам б) с помощью искусственно достроенных липких концов. [c.116]

Лигирование олигонуклеотидных зондов, ЛОЗ (Oligonu leotide ligation assay) Метод выявления однонуклеотидных замен в гене-мишени с помощью коротких олигонуклеотидов, комплементарных противоположным цепям тестируемого отрезка ДНК. Если замена отсутствует, то оба олигонуклеотида полностью гибридизуются с ДНК, и после добавления в реакционную смесь ДНК-лигазы происходит их сшивание (лигирование). В противном случае сшивание оказывается невозможным. [c.552]

Однако после такого спаривания целостность двойной спирали не восстановится, поскольку останется два разрыва в фосфодиэфирном остове. Для их восстановления, т. е. сшивания, или лигирования нитей используют фермент ДНК-лигазу. Таким образом, лигаза завершает образование рекомбинантной молекулы ДНК. Впервые такие эксперименты были выполнены в 1972 г. (П. Берг, США) и было показано, что использование рестриктазы, дающей липкие концы, в сочетании с ДНК-лигазой может послужить основой для создания общего метода получения рекомбинантных молекул ДНК. В этой лаборатории впервые были соединены рекомбинантное ДНК вируса SV40 и бактериофага X с галактозным опе-роном Е oli. [c.34]

Для изучения сплайсинга тРНК можно использовать бесклеточную систему. Реакция in vitro требует присутствия АТР, й ее можно разбить на два этапа, осуществляя сплайсинг в отсутствие АТР. Первый этап включает расщепление фосфодиэфирной связи, протекающее как необычная нуклеазная реакция. На втором этапе происходит образование связи эта реакция называется сшиванием (лигированием), а осуществляющий ее фермент на-зывается РНК-лигазой. До сих пор не известно, присуши ли нуклеазная и лигазная активности одному ферменту или разным ферментам. Две стадии реакции сплайсинга изображены на рис. 26.3. [c.318]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология