Ткани-няньки

Рис. 6.1. Выращивание отдельных клеток с помощью ткани- няньки (по Р. Г. Бутенко, 1999)

Метод ткани- няньки — кондиционирующий фактор вьще-ляется находящимися рядом с одиночной клеткой кусочками тка-ни- няньки (рис. 6.1). [c.168]

Однако при соблюдении всех этих условий процент разделившихся клеток остается очень низким. Более эффективны методы кормящего слоя (рис. 10) или ткани-няньки . Для создания кормящего слоя берут суспензию клеток того же вида растения, что и одиночная клетка, или близкого вида. Клеточная суспензия должна находиться в ранней экспоненциальной фазе ростового цикла. Каллусная культура, служащая тканью-нянькой , также должна быть в состоянии активного роста. При достижении колонией, возникшей из отдельной клетки, 0,5—1 мм клон может быть перенесен для дальнейшего выращивания на агаризованную питательную среду непосредственно или на фильтр, помещенный на поверхность агара. Использование кормящего слоя , ткани-няньки и минимального объема среды, в которую помещается отдельная клетка, связаны с феноменом, называемым действие фактора кондиционирования . Несмотря на многочисленные попытки определить химическую природу веществ (или вещества), индуцирующих, деление отдельной клетки, и механизм действия фактора кондиционирования, ясности здесь пока нет. Пожалуй, уверенно можно сказать только то, что фактор этот химической, а не физической природы и включает низкомолекулярные вещества (М. К- Павлова, Р. Г. Бутенко, 1965). [c.29]

Культура-нянька — рост клетки или клеток на подлежащей культуре различного происхождения, которая в свою очередь находится в контакте с культуральной средой. Культивируемая клетка или ткань может быть отделена от питательного слоя пористым материалом — фильтрованной бумагой или мембранными фильтрами. [c.495]

Трудности культивирования одиночных клеток связаны с тем, что отдельная клетка не делится в тех условиях, в которых хорошо растет каллусная ткань. Для того чтобы заставить одиночные клетки делиться, разработаны специальные методы. В 1960 г. Джонсон предложил метод няньки , при котором функцию няньки , стимулирующей деление одиночной клетки, выполняют кусочки каллусной ткани, отделенные от нее фильтровальной бумагой. В присутствии няньки одиночная клетка делится и дает индивидуальную колонию клеток — клон. [c.95]

Разработан метод получения и выращивания больших масс клеточных суспензий (L. Ni kell, W. Tule ke, 1959), а также метод культивирования отдельной, выделенной из суспензии клетки, деление которой индуцируется с помощью ткани-няньки (L. Jones et al., 1960 М. К- Павлова, Р. Г. Бутенко, 1965). [c.12]

Для этого следует распределить суспензию (около 1 мл) из одной или двух-трех ампул на поверхности агаризованной питательной среды (5—6 мл) в чашке Петри, Коха или в небольшой колбочке. Чашки заклеивают парафилмом, причем для лучшего газообмена чашки Коха можно заклеивать не сплошь, а секторами. После прилипания клеток к агару (через 2 сут) лучше отсосать избыток жидкости. Полезно использовать также чашки с жидкой средой и мостики из фильтровальной бумаги, на которые помещают фильтры или целлофановые диски с клетками. Объем среды должен быть минимальным. Жидкая среда улучшает метаболизм, ускоряет рост и позволяет легко заменять ее не целиком, а наполовину, чтобы сохранить факторы кондиционирования. На отдельный мостик в ту же чашку можно посадить ткань-няньку (хорошо растущий каллус в экспоненциальной фазе, его лучше менять на новый через каждые [c.75]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология