Нуклеиновые кислоты денситометрия

Для белков коэффициент экстинкции при 280 нм намного ниже, чем соответствующая величина для нуклеиновых кислот при 260 нм, и зависит от содержания в белках тирозина и триптофана. Поэтому определение белков в УФ-свете по поглощению при 280 нм представляет собой менее чувствительную процедуру, чем методы окрашивания (рис. 70), К тому же для количественной оценки получаемых данных необходимо учитывать, что разные белки имеют неодинаковые коэффициенты экстинкции. Без построения специальных калибровочных кривых денситометрия в УФ-свете не позволяет производить прямое количественное сравнение кривых различных белковых зон. С помощью отдельных денситометров можно выявлять до [c.182]

Обнаружение полос (зон, пиков) в случае достаточной концентрации в них белков или нуклеиновых кислот нередко ведут по поглощейию света в ультрафиолетовой области спектра. Для частиц иногда удается регистрировать мутность в диапазоне длин волн 500—600 нм. Желательно, чтобы трубки, идущие от пробирки с градиентом к проточной кювете денситометра и, далее, к коллектору фракций, во избежание смещивания градиента в них были по возможности короткими и тонкими. Объем проточной кюветы также должен быть небольшим. Движение жидкости по кювете и трубкам должно происходить снизу вверх — опять-таки во избежание образования участков обратного градиента , где более плотная жидкость окажется над менее плотной. Разумеется, это справедливо для тех случаев, когда фракционирование градиента начинают от мениска. В случае отсасывания со дна пробирки, наоборот, жидкость в трубках и кювете должна течь сверху вниз. [c.222]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология