Хромосома, определение молекулярной массы

Абсолютный размер молекул ДНК генома накладывает определенные ограничения на хроматографические и электрофоретические методы, которые могут быть использованы для разделения этих соединений. Даже вирусные ДНК во много раз длиннее встречающихся в природе РНК. Хромосомы большинства бактерий состоят из единственной молекулы ДНК с молекулярной массой около 3-10 (10 пар оснований), а молекулярная масса содержащейся в клетках животных ядерной ДНК еще на три порядка больше (молекула состоит из 10 пар оснований). В силу очень высокого отрицательного заряда и значительных по величине неионных взаимодействий высокомолекулярных ДНК с сорбентом разделение этих соединений с помощью анионообменной хроматографии практически невозможно. В случае гель-электрофореза также приходится сталкивать- [c.183]

Второй тип скоростной зависимости имеет место в случае очень больших молекул при низких концентрациях. Для ДНК Т4 (молекулярная масса 106-10 ) при переходе от 65000 к 10 000 об/мин увеличение 5 составляет 9%. При еш,е больших молекулах ДНК , молекулярная масса которых превышает 500-10 , скоростная зависимость становится значительной и может приводить к ошибке в 3 и даже в 8 раз при оценке молекулярной массы. Важность этого явления легко оценить, если принять во внимание то, что хромосомы бактерий и клеток эукариотов обладают ДНК с молекулярной массой в пределах от 2-10 до 10-10 . В качестве иллюстрации на рис. 11-16 показано, что после достижения определенной скорости зависимость 5 от молекулярной массы исчезает. Зимм объяснил этот удивительный факт изменением формы (протяженности) молекулы ДНК при высокой скорости из-за увеличения торможения трением у концов молекулы. (Предполагают, что скоростная зависимость такого типа отсутствует для кольцевых молекул ДНК, однако пока это еще не проверено.) Отсюда ясно, что для проведения различий в молекулярной массе очень больших молекул ДНК необходимо использовать центрифугирование при весьма низких скоростях (или проводить измерения упруговязкостных свойств, см. гл. 13). [c.297]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология