Иммуноэлектрофорез ИЭФ буфер антисыворотки

При электрофорезе в первом направлении для улучшения растворимости белков нередко вводят неионный детергент, например 1%-ный раствор Тритона Х-100. Можно вести электрофорез в агарозе и в присутствии ДДС-Na (также только в интересах растворимости, ведь разделение белков по размерам в геле агарозы производить не целесообразно). ДДС-Na при перекрестном иммуноэлектрофорезе под действием поля может переходить в слой агарозы, смешанной с антисывороткой. Этого следует избегать, так как уже упоминалось, что ДДС-Na мешает образованию иммунного комплекса антиген — антитело. В этом случае гель первого направления предварительно вымачивают в буфере, содержащем избыток Тритона Х-100, а иногда его вводят и в состав геля агарозы с антисывороткой. Тритон Х-100 вытесняет ДДС-Na из комплекса с белком й образует с ним смешанные мицеллы, не препятствующие иммунопреципитации. [c.149]

При иммуноэлектрофорезе сначала разделяют смесь антигенов действием электрического поля (антигены с разной скоростью мигрируют в агаровом геле, приготовленном на соответствующем буфере). Затем заполняют антисывороткой траншею, идущую параллельно движению антигенов под действием электрофореза, и проводят иммунодиффузию. [c.367]

После окончания первой меры иммуноэлектрофореза агарозный гель разрезают на две полосы параллельно направлению мифации белков и укладывают на обращенный к катоду край стеклянной пластинки размером 4.5 х 12 см. При этом направление разделения белков в первой мере должно быть от центра к обоим краям. Остальную часть пластинки заливают 12 мл расплавленной и охлажденной до 40°С агарозой в смеси с антисывороткой, приготовленной на 0.025 М ацетат-барбиталовом буфере с pH 8.9 так, чтобы новый слой геля имел такую же толщину, как полоса первого направления и сплавился с ней в один сплошной слой. Стекло со слоем геля на нем помещают на горизонтально расположенный столик прибора для электрофореза в агарозе и [c.80]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология