Неомицин фосфотрансфераза

В связи с возможной трансформацией бактерий желудочно-кишечного тракта вернемся к гену прШ, вызываюш ему устойчивость к антибиотику, пусть и устаревшему. Вероятность его передачи из пиш и микробам желудочно-кишечного тракта оценивается примерно так же, как и вероятность ГПГ от растений к бактериям почвы (правда, пока пиш у готовят и переваривают, молекулы ДНК испытывают много разрушающих воздействий механические, термические, ферментативные, так что в итоге уцелеть перенесенному гену в желудке трудно). Тем не менее в ряде руководств и правил, действующих в генной инженерии, учитывают как возможный перенос генов в микроорганизмы желудочно-кишечного тракта, так и свойства белков — продуктов этих генов. Так, в руководстве Использование устойчивых к антибиотикам генов-марке-ров в трансгенных растениях , выпущенном в 1998 г. специальным ведомством США, оценивающим пищевую безопасность продуктов, указано, что продукт гена прШ (фермент неомицин-фосфотрансфераза) нетоксичен и не вызывает аллергии и что употребление в пищу сырых ГМ-томатов, содержащих этот ген, не влияет на терапию с применением канамицина или хожих антибиотиков, например, неомицина (исследование проводили на томатах, но результаты применимы и, скажем, к картофелю — если кто-то любит картошку сырой). Там же отмечено, что наличие упомянутого фермента в кормах безопасно для скота. В итоге сделан вывод о том, что присутствие в ГМ-растениях гена устойчивости к канамицину и вырабатываемых под его контролем белков не вызывает опасений с точки зрения эпидемиологии. Аналогичные выводы содержатся и в подготовленном в 2001 г. докладе Европейской федерации по биотехнологии. [c.85]

Упаковывающие экстракты могут убивать бактерии, несущие космиды. Если объемное соотнощение разведенной упаковывающей смеси и стационарной культуры больще, чем 1 4 — 1 2, титр космид резко снижается. Мы обнаружили также, что ка-кой-то компонент упаковывающей смеси способен подавлять рост бактерий на чащках, даже если он присутствует. в больщем разведении, чем 1 4. Мы разработали методику (табл. 2.3),. которая, по-видимому, позволяет решить эту проблему и обеспечивает достаточно времени для того, чтобы даже медленно экспрессирующийся ген неомицин-фосфотрансферазы (КтО экспрессировался полностью. Эта методика может быть использована как для аналитических, так и для препаративных целей, но не следует высевать на чашки более 500 мкл конечной суспензии клеток. [c.51]

Кроме того, использован ген пео транспозона Тп5, кодирующий аминогликозидфосфо-трансферазу (неомицин-фосфотрансферазу), которая деградирует антибиотик широкого спектра действия G-418 (2-дезоксистрептамин). Клетки млекопитающих чувствительны к данному антибиотику, поэтому при введении в них гибридных плазмид серии pSV-иео на среде с G-418 удается отбирать клоны устойчивых трансформантов. Плазмидная ДНК интегрируется в геном клеток в виде множественных повторов и стабильно сохраняется при росте клонов трансформантов в неселективных условиях. [c.349]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология