Кинетические исследования киназ

Кинетические исследования киназ [c.666]

Все киназы (фосфотрансферазы) этого типа, т. е. ферменты, катализирующие образование обычных 0-фосфатных эфиров, используют в качестве донора фосфата какой-нибудь нуклеозидтрифосфат (по большей части АТФ) и нуждаются в катионе двухвалентного металла (обычно М +). Данные кинетических исследований и спектры магнитного резонанса показывают, что ионы металла, играющие роль кофактора, сначала взаимодействуют с АТФ и образуют двойной комплекс. Именно этот комплекс служит истинным субстратом реакции и связывается с ферментом. Эксперименты с субстратом, меченным с помощью 0 , показали, что реакция переноса фосфата протекает в действительности следующим образом [c.283]

Изучение киназ осложняется образованием большого числа возможных промежуточных соединений, которые необходимо учитывать. Кроме двух субстратов и фермента, в системе всегда присутствуют ионы металла-активатора, которые образуют комплексы с нуклеотидным субстратом, а иногда также и с ферментом и со вторым субстратом. Вообще говоря, кинетическое исследование всех киназ, по-<в идимому, можно проводить, полагая, что истинными активными субстратами являются МАДФ и МАТФ -[6]. Однако нельзя быть полностью уверенным в том, что данная гипотеза правильно отражает действительный механизм ферментативной реакции. Причиной ошибочных заключений в таких случаях может являться неспособность модели различать отдель--ные пути реакции. [c.666]

Таким образом, изучение четвертичной структуры и некоторых, кинетических свойств НАД-киназы из скелетных мышц кролика, сердца голубя и печени кролика позволило обнаружить большое сходство между этими ферментами. AHajfH3 изложенного выше-материала, на наш взгляд, убедительно свидетельствует в пользу принадлежности всех трех НАД-киназ к диссоциирующим ферментным системам, регуляция активности которых может осуществляться путем смещения равновесия между олигомерными формами, обладающими различной каталитической активностью. При этом обнаружены некоторые различия между ферментом из скелетных мышц кролика и сердца голубя в регуляции ферментативной активности. Из данных кинетических исследований препарата НАД-киназы из скелетных мышц кролика следует, что смещение равновесия между олигомерными формами происходит при изменении концентрации субстратов, pH среды инкубации, в присутствии цАМФ или при добавлении разных концентрации [c.147]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология