кажущийся методом Тизелиуса

Оценка чистоты. — Шведские химики Сведберг и Тизелиус внесли большой вклад в развитие химии белка разработкой аналитических методов, чрезвычайно удобных для характеристики этих, высокомолекулярных соединений. Метод ультрацентрифугирования Сведберга служит для определения молекулярного веса. При вращении с очень большой скоростью ячейки, содержащей раствор белка, молекулы белка под действием центробежных сил движутся от центра со-скоростью, зависящей от величины молекулярного веса. Специальная оптическая система дает возможность наблюдать и фотографировать ячейку во время центрифугирования. Молекулярный вес может быть, найден либо из определения седиментационного равновесия, либо по-скорости седиментации- Хотя теоретически первый метод точнее, для достижения равновесия требуется длительное время, и поэтому более точные значения получают, исходя из определения скорости седиментации. При применении ультрацентрифуги можно установить также гомогенность молекул (по величине и форме). Тизелиус предложил (1937) электрофоретический метод разделения молекул белка в электрическом поле молекула белка движется со скоростью, определяющейся величиной молекулы, ее формой, количеством и типом ионизированных групп. Материал, кажущийся гомогенным по растворимости, может содержать компоненты, отличающиеся по электрофоретической подвижности. Жестким критерием чистоты является профиль кривой распределения, получаемой при противоточном распределении молекул (Крейг, см. 31.29). [c.674]

Имеются еще два способа использования аппарата Тизелиуса для электрофореза по методу свободной границы, которые позволяют оценить гомогенность и полидисперсность макромолекулярных препаратов, а именно метод стационарной восходящей границы [25] и метод обратимого расширения границы [26, 27]. Оба метода позволяют отличить монодисперсные препараты от полидисперсных и не обязательно связаны с гомогенностью, как она определена здесь. Первый метод требует наблюдения восходящей границы при продолжительном электрофорезе. При этом наблюдается эффект обострения границы вследствие изменения проводимости в области ее зоны для монодисперсных препаратов этот эффект через некоторое время уравновешивается размыванием границы за счет диффузии. Форма границы становится тогда постоянной. Такое стационарное состояние не достигается для полидисперсных препаратов (метод не вполне строг [14]). Метод обратимого расширения границы предусматривает наблюдение стационарной границы в изоэлектрической точке. Граница электрофоретически полидисперсного материала будет расширяться в электрическом поле, и это расширение будет налагаться на расширение, вызываемое диффузией. Однако в противоположность расширению, вызываемому диффузией, электрофоретическое расширение будет обратимым при изменении направления тока [28]. Кажущийся коэффициент диффузии, рассчитанный для расширяющейся границы в электрическом поле Е в см), может быть представлен как функция времени [c.46]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология