Асептическая техника

ПОД руководством опытного оператора. Требования, предъявляемые к асептической технике, основаны главным образом на [c.113]

Все детали хорошей асептической техники нельзя описать в книге. Они могут быть освоены лишь при практической работе [c.112]

Асептическую технику применяли при приготовлении рабочего раствора, при переносе бактерий и вирусной суспензии и при фильтровании. Песок, используемый в фильтрах, не выдерживали в автоклаве, так как было определено, что деионизированная вода, проходящая через песок, не содержала частиц вирусов. Кроме того, были опасения, что поверхностные характеристики зерен песков могут измениться в результате обработки в автоклаве. [c.80]

Проблемы асептики для производства аминокислот, ферментов и т. п., напротив, могут быть решены лишь путем создания такой технологии и аппаратуры, которые обеспечивали бы гарантированную защиту культуральной среды от попадания посторонней микрофлоры на всем протяжении процесса, т. е. в течение десятков и сотен часов. Приемы, позволяющие реально осуществить асептические процессы, удовяетворяющие этим требованиям, описаны, в специальной литературе и частично рассмотрены в последующих главах. Можно лишь подчеркнуть, что они основаны на многолетнем опыте создания и эксплуатации процессов асептического микробиологического синтеза, а этот опыт неопровержимо показал отсутствие мелочей и необходимость на всем протяжении производственного цикла строго соблюдать правила работы, обеспечивающие допустимо малую вероятность контаминации. В этом отношении решения по промышленной асептике в микробиологическом синтезе уместно сравнить с правилами техники безопасности, имеющимися в любом промышленном производстве построенные на отрицательном опыте, они дают положительный результат только при их безусловном соблюдении. [c.20]

Использование антибиотиков в стоках культур крайне нежелательно. Невольное ослабление строгости требований асептической техники при использовании антибиотиков приводит к заметному загрязнению культур. Рост загрязняющих бактерий может тормозиться антибиотиками, но биохимические изменения могут все же иметь место. При селективных условиях происходит отбор резистентных к антибиотикам микроорганизмов, а затем эти микроорганизмы, как лесной пожар, могут распространиться по всем культурам лаборатории. [c.114]

Использование антибиотиков должно быть ограничено кратковременными экспериментами. Эти эксперименты могут включать в себя наращивание большого количества клеток в течение недели или около того, и пересев такого большого количества клеток и последующие манипуляции трудно выполнить с соблюдением правил асептической техники. В конце эксперимента такие культуры нельзя возвращать в стоки. Их следует считать загрязненными. [c.115]

Стандартный многопластинчатый блок состоит из 10 камер с рабочей поверхностью 600 см каждая. Камеры скреплены друг с другом и снабжены соединяющими их каналами. Это позволяет проводить каждую операцию для всех камер одновременно. Следовательно такой блок можно рассматривать как сосуд с рабочей поверхностью 600 см , использующий 2 л среды и занимающий объем 12 500 см . Этот блок удобен для практического использования и позволяет получать такие же хорошие результаты, как и при выращивании в пластиковых флаконах. Блок сделан из полистирола и предназначен для одноразового использования. Один из недостатков этой системы может обернуться ее преимуществом. На практике бывает трудно удалить все клетки после их открепления от подложки трипсином или другими агентами. Однако остающиеся в блоке клетки можно использовать в качестве инокулята для новой культуры при добавлении свежей среды. С помощью надежной асептической техники сбора клеток этот блок одноразового пользования. может быть повторно задействован 3—4 раза. Система нескольких соединенных между собой блоков используется в промышленности для производства интерферона [10]. Кроме того, поставляются также блоки с рабочей поверхностью 1200 24 ООО см . [c.81]

Асептические процедуры (методы, техника работы) — процедуры, обеспечивающие предотвращение попадания микробов в клетки, ткани и органы растительных культур, или перекрестное загрязнение одной клеточной культуры другой. Эти процедуры могут/не могут исключить занесение инфицирующих молекул. [c.492]

Использование систем с ламинарным током воздуха делает невозможным перенос бактерий от исследователя в культуру, и в принципе такие системы с ламинарным током воздуха обеспечивают идеальную защиту как культур, так и самих исследователей. Однако уже сам факт, что в поток воздуха попадают руки, нарушает ламинарность и создает завихрения. Па этой причине боксы с ламинарным током воздуха следует использовать как дополнение к стандартной асептической технике. Боксы с ламинарным током воздуха особенно рекомендуются те1л йсследоватёлям, которые желают работать с клетками, но не имеют соответствующего помещения. Боксы могут быть использованы в общей лаборатории без риска загрязнения при условии соблюдения правил асептической техники. При использовании бокса исследователь избегает необходимости работать в маленькой комнате, в которой может быть слишком жарко и душно при отсутствии мощной вентиляционной системы, а кроме того, голова исследователя оказывается отделена от культур пластиковой крышкой бокса, что дополнительно снижает вероятность загрязнения. [c.114]

Техника культивирования каллусных тканей. Большинство эксплантатов образуют первичный каллус, который можно субкультиви-ровать, через 6—8 нед. В асептических условиях каллус следует перенести пинцетом в стерильные чашки Петри, скальпелем отделить каллусную ткань от исходного эксплантата или некротических участков в центре и на нижней стороне каллуса и, разделив каллус на несколько кусочков (5X5 мм), перенести на свежую питательную среду. (Рекомендуется положить кусочек срезанной поверхностью на агар и осторожно прижать его к среде. Использованные пинцеты и скальпели опускаются в 96 %-ный спирт и в процессе работы обжигаются в пламени спиртовки и остужаются между листами стерильной бумаги. [c.240]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология