Тритон содержание в мембранах

В разработанных несколькими группами исследователей [4, 37, 57] ферментных электродах для определения свободного холестерина использовали холестериноксида-зу (СОВ, ЕС 1.1.3.6), иммобилизованную на поверхности коллагеновой мембраны или на найлоновой сетке. Концентрацию свободного холестерина определяли с погрешностью 5-25%. Для определения общей концентрации холестерина сыворотку выдерживают в растворе Тритон Х-100 или дезоксихолатсодержащих растворах с добавкой гидролазы эфиров холестерина (СЕН, ЕС 3.1.1.13). Ту же реакционную схему используют в липидном анализаторе 1СА-ЬО 400 фирмы Тоуо 1ого (Япония). Для получения свободного холестерина пробу сыворотки (30 мкл) предварительно обрабатывают 7,5 мкл раствора СЕН в течение 11 мин при 37 °С. Концентрацию холестерина находят с помощью СОВ, иммобилизованной на кислородном электроде. Быстрый отклик электрода (всего 15 с) обусловлен использованием скоростного метода измерения расхода кислорода. В получаемую величину вносят поправку на сигнал кислородного датчика без фермента. Одновременно с холестерином определяют также концентрацию триглицеридов и фосфолипидов (см. ниже). Производительность анализатора-40 проб в час. Аскорбиновая кислота и билирубин не мешают определению. Уравнение корреляции с данными неспецифического стандартного метода анализа для общего содержания холестерина имеет вид у = 1,03х — 0,15 ммоль/л г = 0,985 (и = 50). [c.272]

Целостность наружной мембраны митохондрий определяют последовательными измерениями активности цитохром с оксидазы в отсутствии и присутствии 0,2% Тритона Х-100. Содержание белка в различных фракциях митохондрий определяют по методу Лоури (Lowry et al., 1951). [c.19]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология