Применение ретровирусных векторов

Применение ретровирусных векторов [c.273]

Ретровирусные векторы, описанные в предпоследней главе, находят сейчас все более широкое применение в практике моле-кулярно-биологических исследований. Мы постарались не погружаться в узкоспециальные проблемы, связанные с ретровирусными векторами, а рассмотреть принципиальные вопросы, касающиеся конструирования и использования подобных систем. [c.9]

Следующий раздел касается некоторых фундаментальных аспектов биологии ретровирусов, на которых базируется их применение в качестве векторных молекул. Разд. 9.3 дает представление о различных конструкциях ретровирусных векторов. В разд. 9.4—9.6 описаны методы размножения вирусов, инфицирования клеток и тестирования вирусных препаратов. Заключительный, разд. 9.7 касается некоторых практических вопросов, которые следует принимать во внимание при работе с данными векторами. [c.274]

Еще одна область, в которой следует ожидать важных результатов, если обратная связь сомы и зародышевой линии будет доказана, — это генная инженерия эукариот. Сейчас развивается новая область лечения врожденных генетических ошибок — соматическая генная терапия. Мы стоим на пороге широкого применения этой технологии в медицине [7]. Если существует генетический канал от сомы к зародышевой линии (хотя бы только для У-генов), можно надеяться, что соматическая коррекция приведет и к фиксации исправленного гена в половых клетках [8] Если бы этот механизм работал, можно было бы, используя ретровирусные векторы, встроить исправленные гены в ядерный геном лимфоцитов пациента, а затем ввести эти клетки в его организм при переливании крови [9]. Это должны быть кроветворные стволовые клетки, которые, дифференцируясь, постоянно пополняют популяции кровяных клеток всех типов. Это означает, что подвижные лимфоциты, включая В-лимфоциты, которые несут и экспрессируют РНК нового функционального гена, могли бы проникать в репродуктивные ткани и передавать новую последовательность ДНК зародышевой линии. Однако вероятность такой передачи неизвестна. [c.188]

Хотя применение ретровирусных векторов требует, чтобы экспрессируемый ген был введен в соответствующий вектор в строго определенной ориентации (это условие в общем случае ограничивает их использование лишь для хорошо охарактеризованных последоательностей) после того, как правильная рекомбинантная конструкция получена, дальнейшие операции по наращиванию вируса и инфицированию клеток-мишеней технически оказываются достаточно простыми. [c.272]

Описано несколько различных упаковывающих клеточных линий для получения чистых препаратов ретровирусных векторов семейства MLV [17, 19, 21, 32]. Из них наиболее широкое применение нашли, пожалуй, линия ij)2 [17], упаковывающая вирусную РНК в экотропные частицы (т. е. такие, которые способны инфицировать только клетки мыши и крысы), и линия РА 317 [32], позволяющая получать амфотропные препараты с широким кругом возможных хозяев, практически не содержащие хелперных вирусов. Известны также упаковывающие клетки для векторов на основе ретровирусов птиц [33]. [c.288]

Для клонирования пео-содержащих провирусов предложены две упрощенные методики каждая из них предполагает селекцию искомого клона в клетках . oli на устойчивость к канами-цину. Одна из методик представляет собой модифицированную процедуру спасения маркера и предусматривает прямое клонирование провируса в плазмидном векторе. Другая методика, гораздо более эффективная, требует применения специальных ретровирусных челночных векторов, описанных в разд. 9.3.2.4. [c.300]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология