Получение иммунных реплик

ПОЛУЧЕНИЕ ИММУННЫХ РЕПЛИК [c.128]

Существенный недостаток нитроцеллюлозных фильтров при получении иммунных реплик — избирательный характер сорбции белков на этих фильтрах. Основные белки, как правило, сорбируются ими хорошо, а кислые иногда практически не сорбируются. Ввиду этого важного обстоятельства предпочтение следует отдать использованию диазобумаги. Кстати, отмеченная в последней работе возможность снятия нескольких реплик с одного геля, по-видимому, сохраняется и для этого варианта. [c.133]

В рассмотренном методе обнаружения антигенов после электрофореза в ПААГ путем их диффузии в слой агаройы иммунная реакция следовала за окончанием этой диффузии, когда снятую с ПААГ агарозную реплику вымачивали в специфической антисыворотке. Два процесса можно совместить во времени, если антисыворотку заставить диффундировать в гель навстречу диффузии антигена из белковых зон, полученных в результате электрофореза [Grabar, Williams, 1953]. При этом можно ожидать образования полос преципитации комплексов антиген — антитело, подобно тому как это имеет место при двойной радиальной иммунодиффузии по методу Ухтерлони. Для удобства наблюдения раствор антисыворотки следует заливать не сверху, а рядом с треком электрофореза, на некотором расстоянии от него, с тем чтобы оставалась свободная полоса ПААГ, где и будет происходить диффузия антигенов и антител навстречу друг другу. Поскольку расположение полос антигенов после электрофореза заранее неизвестно, антисыворотку, очевидно, придется заливать не в лунку, а в канавку, идущую вдоль всего трека. Кроме того, антисыворотку следует вносить в такую канавку только после окончания электрофореза, иначе преждевременная диффузия антител в гель может помешать завершению процесса электрофоретического фракционирования смеси белков. [c.134]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология