Резолваза

У транспозонов, перемещаю, щихся с помощью репликативной транспозиции, образование коинтеграта является промежуточной стадией реакции (см. рис. 77). Конитег-раты разрезаются с помощью сайт-специфической рекомби, нации между двумя ген-сайтами. осуществляемой резолвазой] [c.118]

Сайтспецифическая рекомбинация между двумя копиями транспозона может восстановить исходный донорный репликон, освободив при этом репликон мишени, который приобрел транспозон. Такое событие получило название разрешения фермент, ответственный за эту активность, называется резолвазой. [c.466]

Ген tnpR кодирует белок из 185 аминокислот (23000 дальтон). Различный эффект мутаций в этом гене свидетельствует о двойной функции кодируемого им белка. Этот белок действует как репрессор экспрессии гена и обеспечивает функцию резолвазы. [c.467]

Белок TnpR, функционируя в качестве резолвазы, вовлекается в рекомбинацию между прямыми повторами ТпЗ в структуре коинтеграта. Коинтеграт представляет собой обязательный промежуточный продукт при транспозиции разрешение коинтегратов блокируется в мутантах tnpR , что ведет к образованию только коинтегрированных структур. [c.467]

Разрешение-консервативный процесс связи при этом разрываются и восстанавливаются без поглощения энергии. Для завершения реакций необходимы ионы магния если они отсутствуют, происходит лишь частичная реакция с низкой эффективностью. В результате такой реакции получаются продукты, соответствующие промежуточной стадии в разрешении коинтегратов они состоят из резолвазы, ковалентно связанной с обоими концами, образовавшимися при двухцепочечном разрезе, произведенном в ге.5-сайте. Разрезание производится симметрично в коротких палиндромных областях в результате образуются выступы из двух оснований. Развивая представление об области перекреста, расположенной в сайте I, мы можем описать реакцию разрезания следующим образом [c.468]

При сравнении этих реакций друг с другом и с транспозицией ТпЗ возникают некоторые параллели. Функция hin Salmonella и дги-функция фага Ми могут замещать одна другую в комплементационных экспериментах. (Эти функции заменяет функция гена ein, ответственного за инверсию С-сегмента фага Р1). Несмотря на то что ген tnpR транспозона ТпЗ не способен заместить какую-либо из этих последовательностей, аминокислотная последовательность резолвазы демонстрирует значительную гомологию с последовательностью аминокислот белка Hin. [c.472]

Область перекреста для действия резолвазы проявляет гомологию с последовательностями 1RL и IRR. Последовательность длиной в 34 пары оснований, включающая 1RL, имеет только семь несоответствующих пар по сравнению с инвертированными повторами, лежащими в концах G-сегмента. Отсюда следует, что инверсия / ш-сегмента Salmonella и G-сегмента фага Ми происходит с помощью сайтспецифической рекомбинации между инвертированными повторами, механизм которой имеет общие черты с реакцией, участвующей в разрешении коинтегратов ТпЗ. [c.472]

Транспозиция ТпЗ и родственных ему простых транспозонов происходит репликативным путем с образованием коинтеграта (рис. Ю.Ш). Этот коинтеграт содержит прямые повторы ТпЗ и два сочленения между донорной и реципиентной ДНК. Для его образования. нужна транспозаза-продукт гена tnpA, а также элементы IR-L и 1R-R необходим также репликативный аппарат клетки-хозяина. Разрешение включает внутримолекулярную сайт-специфическую рекомбинацию между двумя г№сай-тами двух ТпЗ-элементов (рис. Ю.6) и протекает при участии продукта гена iw/ R-белка резолвазы. Если ген tiipR отсутствует, то разрешение может происходить при помощи рекомбинационного аппарата [c.234]

По-видимому, при инверсии образуется сложный комплекс, состоящий из инвертируемого сегмента ДНК и рекомбиназы (Hin или Gin), расположенных друг относительно друга в нужном положении. Формирование комплекса облегчает фактор II, связывающийся с энхансером, а также белок HU есть данные о том, что последний обеспечивает изгибание ДНК. необходимое для сближения двух рекомбинационных сайтов. Для инверсии нужно, чтобы в одной молекуле ДНК присутствовали два рекомбинационных сайта, находящихся в противоположной ориентации. В отличие от этого резолваза ТпЗ предпочитает, чтобы эти сайты имели одинаковую ориентацию. Однако в обоих случаях в рекомбинации участвуют четыре цепи ДНК, происходит разрыв четырех фосфодиэфирных связей и четыре новых соединения (рис. 10.51). [c.275]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология