Хроматографическая колонка с мягкими гелями

Как показывает наш собственный многолетний опыт и опыт других исследователей [4], сефадекс серии О можно довольно долго хранить в набухшем состоянии в 2М уксусной кислоте в холодильнике. Если гель, помещенный уже в хроматографическую колонку, не будет сразу же использован, его также следует промыть 2М уксусной кислотой и хранить в ней, а непосредственно перед употреблением промыть соответствующим буферным раствором. Набухшие гели можно высушить н перевести в исходное порошкообразное состояние следующим способом. К хорошо промытому и освобожденному от солей гелю добавляют этанол (небольшие количества геля обрабатывают на воронке с фильтром из пористого стекла, большие количества — в пригодных для этого сосудах), осторожно перемешивают суспензию и дают ей отстояться. Жидкость над гелем отсасывают и эти операции повторяют до тех пор, пока не получатся высохшие частицы геля. Высушить твердые гели несложно. При сушке мягких гелей рекомендуется сначала добавлять 50%-ный этанол, а затем повышать его концентрацию. При добавлении спирта к суспензии мягких гелей, т. е. гелей с большим содержанием воды, поверхность частиц геля сильно обезвоживается и образуются комки, которые высушиваются с трудом. Если такие комки все-таки образовались, то лучше [c.375]

Поэтому, чтобы избежать инфицирования гелей, в суспензии гелей, заполненные колонки и элюенты добавляют бакте-риостазы, которые не должны реагировать ни с матрицей геля, ни с хроматографируемыми соединениями, не должны денатурировать или осаждать их. Если ход хроматографирования прослеживается по УФ-поглощению, то эти соединения не должны также поглощать в той спектральной области, которую используют для обнаружения. В самом начале развития гель-хроматографии был предложен в качестве бактериостазов ряд соединений, в частности толуол, фенол, крезол, формальдегид и хлороформ (см. также гл. 5, табл, 5.10). Однако фенолы и формалин вступают в реакцию с белками и вызывают необратимые их изменения. Хлороформ, который применяется в виде насыщенных водных растворов, непригоден для работы с мягкими гелями, так как вызывает уменьшение степени набухания и, таким образом, неблагоприятно влияет на хроматографические свойства этих гелей. Он также непригоден в тех случаях, когда колонки оснащены пластмассовыми трубками, так как повреждает их. [c.376]

Уже упоминалось, что ввиду сжимаемости многих матриц для гель-фильтрацип перепад давлений, приходящийся на колонку, и максимальную скорость. элюцпи (эти величины взаимосвязаны) в ряде случаев следует ограничивать. Подчеркнем, что эти ограничения необходимы не только уже в ходе хроматографического процесса, но п во время заполнения колонки. Как будет показано ниже, наиболее мягкие матрицы не выдерживают даже гидравлического напора, обусловленного высотой самой колонкп. Разность уровней в этом случае надо уменьшать с помощью защитной петлп на ее выходе. Для сефадексов от 0-10 до 0-75, сефароз СЬ-6В и СЬ-4В, биогелей Р-2 — Р-10, А-0,5т и А-1,5т, а также всех сефакрилов эта проблема не возникает, поскольку они обладают достаточной [c.128]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология