Белки аминокислотный в бесклеточной системе

Определение и в опытах на животных по сравнению с определением этого параметра в клетках бактерий, культурах клеток эукариотов и бесклеточных системах осложняется следующими обстоятельствами. При введении животным меченой аминокислоты 1) удельная активность аминокислотного пула не сохраняется постоян- ной 2) имеют место большие индивидуальные колебания величин включения радиоактивных предшественников 3) 1м существенно отличается от 1мж. поскольку некоторое время затрачивается на поступление метки во внутриклеточный аминокислотный пул и прекращение синтеза белка после удаления исследуемого органа. Кроме того, хотя это условие не является обязательным, кинетику синтеза полипептидных цепей удобнее исследовать на стационарной стадии мечения (1м 1с). [c.278]

Общепринятая схема биосинтеза белка требует присутствия в цитоплазме живой клетки особого вида РНК, нуклеотидная последовательность которой определяет аминокислотную последовательность синтезируемого белка. Справедливость этой схемы была подтверждена получением в бесклеточной системе белкового синтеза полипептидов определенной аминокислотной последовательности в присутствии синтетических полинуклеотидов (см. стр. 83) и специфических вирусных белков в присутствии РНК вирусов. Однако до сих пор из нормальной клетки не удалось получить в индивидуальном состоянии РНК, которая была бы способна вызывать синтез определенного белка при взаимодействии с рибосомами и аминоацил-тРНК. [c.40]

Как мы уже сказали, генетический код был расшифрован в результате исследований поведения тринуклеотидов и синтетических матричных РНК в бесклеточных системах, полученных из бактерий. Возникают два вопроса. Одинаков ли генетический код in vivo и in vitro Одинаков ли генетический код у всех организмов Убедительный ответ на эти вопросы был получен при анализе мутаций у вирусов, бактерий и высших организмов. Известно множество аминокислотных замен, возникающих в результате мутаций в генах гемоглобина человека, белка обо- [c.76]

Использование дрожжевых систем экспрессии в биотехнологии и научных исследованиях. Крупномасштабный синтез рекомбинантных белков является одной из основных целей, для достижения которой конструируются системы экспрессии рекомбинантных генов в клетках дрожжей [255]. Синтезируемые рекомбинантные белки могут накапливаться в цитоплазме клеток, после чего их выделяют по традиционной схеме с использованием многостадийной очистки из бесклеточных экстрактов, получаемых после разрушения клеток. Популярными также являются системы, обеспечивающие секрецию рекомбинантных белков в культуральную среду. В этом случае секрецию можно обеспечить, например, включением в рекомбинантный белок аминокислотной лидерной последовательности препро-а-фактора S. erevisiae, которая направляет синтезируемые молекулы в секреторные гранулы [256]. [c.173]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология