Палиндромы Плазмиды

В одном методе используют короткие двухцепочечные молекулы ДНК ( линкеры ), содержащие палиндром, узнаваемый E oRI (или аналогичной рестриктазой). Такие линкеры могут быть синтезированы химически и затем ковалентно присоединены к концам плазмиды или встраиваемого фрагмента путем сшивания тупых концов. Это позволяет затем выделить встроенную ДНК с помощью расщепления рестриктазой E oRI, но без наложения ограничений на исходный выбор сайтов рестрикции, используемых для создания концов. В настоящее время имеется достаточное число методик, позволяющих встраивать любой фрагмент чужеродной ДНК в любой специфический сайт вектора и при необходимости выделять этот фрагмент в чистом виде. [c.241]

П. Мекок и С. Коэн (1980 г) установили, что в составе плазмиды pS lOl находится участок par размером не более 270 пн, который функционирует только в г/мс-положении. Определена нуклеотидная последовательность этого участка и показано, что он имеет палиндром-ную структуру (содержит инвертированные повторы) и с ним могут связываться определенные белки. В плазмиде pS lOl участок par находится около локуса ori, но отличен от него и не связан с генами, контролирующими копийность или несовместимость плазмиды. [c.205]

На образовавшейся одноцепочечной кольцевой ДНК имеется сегмент pal с палиндром-ной последовательностью, способной формировать шпилечную структуру. На этой шпильке инициируется ориентированный синтез комплементарной цепи ДНК. Механизм синтеза пока не ясен, но полагают, что он аналогичен изученному для мелких фагов Е. соН типа 0X174, у которых на шпильке образуется РНК-затравка и с ней взаимодействуют ферменты, обеспечивающие синтез комплементарной цепи ДНК. В сбалансированной системе эффективной репликации плазмид по рассмотренному механизму одноцепочечная форма составляет лишь 3-5 % суммарной плазмидной ДНК. Если же взаимодействие ферментов и ДНК по той или иной причине нарушено (мутации в плазмиде или гетерологичные клеточные ферменты), содержание одноцепочечной формы может значительно увеличиться, что приводит к снижению копийности плазмиды и нестабильности ее сохранения в бактериальной культуре. [c.242]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология