Глутаральдегид как фиксатор

Механизм действия глутаральдегида объясняется—в определенной мере подобно формальдегиду—его способностью к образованию стабильных поперечных сшивок, что и обеспечивает сохранение структуры. Кроме того, этот фиксатор способен заполнять пространство между соседними аминогруппами за счет образования мостиков. [c.36]

При предварительной обработке ткани для гистохимического выявления глюкозо-6-фосфатазы следует обращать внимание на значительную чувствительность фермента к действию фиксатора. Фиксация погружением в холодный формалин или глутаральдегид приводит к значительной инактивации фермента. Наилучшей можно считать непродолжительную фиксацию перфузией глутаральдегидом в низкой концентрации. Поскольку гистохимическое выявление этого фермента проводится при pH 6,5, [c.186]

Рис. 4-14. Глутаральдегид и тетраоксид осмия наиболее распространенные фиксаторы, используемые в электронной микроскопии. Две реакционноспособные альдегидные группы глутаральдегида позволяют сщивать различные типы молекул с помощью ковалентных связей, вытесняющих атомы водорода (выделены цветом). Тетраоксид. осмия восстанавливает многие органические соединения, с которыми образует поперечно-сщитые комплексы. Это свойство особенно пенно в случае клеточных мембран поскольк тетраоксид осмия реагирует с двойными

Промытый осадок суспендируют в 1%-ной четырехокиси осмия и оставляют на 6—16 ч при комнатной температуре. (Фиксированный глутаральдегидом осадок перед проведением этого этапа можно заключить в агар см. этапы 6—8.) Предупреждение работать с летучими и токсичными фиксаторами и другими веществами следует под тягой или по крайней мере надев очки и респиратор, чтобы защитить эпителий роговицы и дыхательных путей. Если чувствуется запах четырехокиси осмия, глаза могут подвергнуться опасному воздейст-ви о паров. Для того чтобы исключить возможность повреждений, в лаборатории в определенном месте должен находиться комплект для промывки глаз [Nalge Со], используемый в случае необходимости. [c.109]

По-видимому, если после фиксации 2,5%-ным глутаральде-гидом в 0,1 М NaP04 (pH 7,0) в течение 2—3 мин на льду предусмотрено тщательное отмывание, то в ткани остается достаточное количество GUS. Способ фиксации следует эмпирически подбирать для каждой новой системы. Формальдегид может оказаться более мягким фиксатором, чем глутаральдегид, и в нем можно проводить фиксацию дольше. [c.374]

Подсчет эритроцитов в розетках и морфологическое исследование каждой розеткообразующей клетки проводят на фиксированных и окрашенных препаратах. В качестве фиксатора используют глутаральдегид (50 об.%, Fisher S ientifi o.)—реактив, вызывающий образование поперечных сшивок в белках (Sabatini et al., 1963). Основной раствор разбавляют дистиллированной водой до концентрации 25% и хранят в темноте при 4°С с активированным углем (одна пятая объема). Перед опытом раствор разбавляют до 5% охлажденным (4°С) физиологическим раствором, забуференным фосфатами (pH 7,4). Попавший в рабочий раствор уголь удаляют центрифугированием. [c.261]

Однако, анализируя данные табл. 4, можно видеть, что способность альдегидов сохранять структуру не всегда коррелирует с их способностью сохранять ферментатив-Е[ую активность. Например, акролеин—плохой фиксатор для ферментов, а альдегиды 3-й группы не подавляют ферментативной активности. Хорошим фиксатором является глутаральдегид, который обеспечивает и сохранность структуры и стабилизацию ферментрв. Благодаря этому он служит основным фиксатором при электронно-микроскопическом выявлении ферментов. [c.38]

Значение моно- и диальдегидов для фиксации ферментов при ультраструктурных исследованиях сегодня неоспоримо (табл. 10). Из перечисленных в табл. 10 фиксаторов наименьшим инактивирующим действием обладают глиоксаль, оксиадипинальдегид или адипинальдегид, тогда как 6%-ный глутаральдегид вызывает наиболее сильную инактивацию. Таким образом, хорошая сохранность структур, достигаемая при помощи глутаральдегида, со- [c.49]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология