Глутаральдегид

Для трех проб анализируемого раствора в аналогичных условиях были получены следующие значения оптической плотности 0,200 0,205 0,195. Вычислить концентрацию глутаральдегида в пробе. [c.154]

Антиген, сополимеризованный с акриламидом Биогель Р-300 с глутаральдегидом [c.288]

Белки, сшитые глутаральдегидом [c.289]

Специфические антитела ный с помощью глутаральдегида Сефароза 4В 1218 [c.313]

Полимер из аффинных лигандов, полученный сшиванием глутаральдегидом Целлюлоза [c.321]

Конканавалин А, полимеризованный глутаральдегидом Сефароза 4В [c.335]

Протеогликаны из ахиллового сухо- глутаральдегидом Конканавалин А—сефароза 26 [c.336]

Химотрипсин, полимеризованный глутаральдегидом Сферой 300 Сефароза 4В [c.337]

Молекулы, которые ковалентно присоединяются к ферменту и / при необходимости к другим молекулам, например глутаральдегиду, [c.92]

После присоединения фермент можно закрепить более прочно сшивкой с глутаральдегидом (см. метод 5). Адсорбированные ферменты эквивалентны связанным с мембраной ферментам в клетках [c.92]

Для приготовления постоянного препарата, который можно окрасить и наблюдать в микроскоп, необходимо сначала обработать клетки фиксирующим агентом с тем, чтобы иммобилизировать, убить и сохранить их. Используя химические термины можно сказать, что фиксация повышает доступность клеток красителям макромолекулы клеток скрепляются поперечными сшивками, что стабилизирует и закрепляет их в определенном положении. Некоторые ранние методы фиксации включали обработку кислотами или органическими растворителями, например, спиртом. В современных методах, как правило, используется обработка альдегидами, например, формальдегидом или глутаральдегидом, которые формируют ковалентные связи со свободными аминогруппами белков и, таким образом, сшивают соседние молекулы. [c.175]

В электронном микроскопе все образцы подвергаются действию вакуума высокой степени разрежения и поэтому их невозможно наблюдать в живом влажном состоянии. Ткани обычно сохраняют с помощью фиксации - сначала глутаральдегидом, ковалентно связывающим белковые молекулы между собой, а затем осмиевой кислотой, связывающей и стабилизирующей двойной слой липидов и белки (рис. 4-14). Электроны обладают низкой проникающей способностью, этим вызвана необходимость получения срезов толщиной от 50 до 100 нм (1/200 толщины одной клетки). Только такие срезы можно наблюдать в электронный микроскоп. Для этого потребовалось также предварительное обезвоживание образца и пропитка мономерными смолами, которые после полимеризации создают твердый блок пластмассы, заключающий образец блок затем режут с помощью тонкого стеклянного или алмазного ножа на специальном микротоме. Полученные срезы не содержат воды или иных летучих органических веществ такие срезы помещают на небольшую круглую металлическую сетку для наблюдения под микроскопом (рис. 4-15). [c.183]

Так как образец в конечном итоге исследуется в микроскопе в вакууме, вода либо должна быть удалена, либо давление ее паров должно быть уменьшено понижением температуры образца. Нет сомнения в том, что химическое обезвоживание приводит к потере легко диффундирующих веществ из клеток и тканей, вызванной химической фиксацией. Хотя критические сравнительные исследования не производились, оказалось, что не существует большой разницы в воздействии этанола, метанола или ацетона в качестве обезвоживающих реактивов. Однако в работе [421] было установлено, что в растительном материале, обезвоженном диметоксипропаном, обнаружена существенно лучшая сохранность ионов (Ыа+, К+, С1 ) по сравнению с обезвоживанием в ацетоне. Можно обойтись без классических процедур обезвоживания, используя инертные процедуры обезвоживания, предложенные в [422], водно-растворимые смолы, метод заливки в глутаральдегиде-мочевине [423] или пропускание материала, прошедшего фиксацию в глутаральдегиде, через глутаральдегид с возрастающимп концентрациями вплоть до 50%, после чего ткань переносится прямо в эпон-812 [404]. Другая процедура [424] заключается в инфильтрации фиксированных образцов раствором поливинилового спирта (МШ 14 000) с возрастающими концентрациями вплоть до конечной 20%-ной концентрации. Вода затем удаляется путем диализа, а образовавшийся твердый гель связан поперечными связями с глутаральдегидом. Однако оказывается, что эти процедуры незначительно снижают потерю растворимых материалов из исследуемых образцов. Простая сушка образца на воздухе также вызывает перераспределение элементов. Таким же образом процедура сушки в критической точке, которая обычно проводится в конце фиксации и обезвоживания, по всей видимости, приведет к слабому различию в концентрации растворимых веществ, которые давно уже были удалены в процессе [c.283]

Ферменты могут адсорбироваться на кремнеземе и при этом сохранять свою активность. Бычий трипсин был адсорбирован на частицах коллоидного кремнезема размером 14 нм, затем с помощью глутаральдегида переведен в нерастворимую форму, так что сохранялось 80 % его активности по отношению к эсте-разе и 17 % его протеолитической активности. Покрытые адсорбированным веществом кремнеземные частицы можно отделить цетрифугированием и затем повторно диспергировать [277]. Фермент адсорбировали из 0,1 М боратного буферного раствора при pH 8,5 при этом вокруг кремнеземных частиц сферической формы диаметром 14 нм формировался мономолекулярный слой из молекул фермента, имевших диаметр 4 нм. Таким частицы можно было наблюдать под электронным микроскопом. Как только такое покрытие формировалось, оно очень прочно связывалось с глутаральдегидом поперечными связями. [c.1060]

Активированный трисакрил используют затем для сшивания с лигандом В качестве примера можно привести иммобилизацию лиганда на трисакриле, активированном глутаральдегидом (рис 9) [c.54]

Амнноэтил-сефароза Антигены, иммобилизованные в ага-розе с помощью сшивания глутаральдегидом ВгСЫ-актнвированная сефароза 4В Сефароза 4В [c.285]

Овотрансферрин и бычий сывороточный альбумин, сополимеризованные хлоругольным эфиром Бромацетилцеллюлоза Биогель Р-300 с глутаральдегидом Сефароза 4В [c.287]

Конканавалин А, полимеризованный глутаральдегидом Фиксированные формалином и убитые теплом бактерии Br N-активированная сефароза 4В с глицилтирозипом Биогель Р-300 [c.290]

Антитела, ио.-ишеризованные хлор угольным эфиром Антитела, сшитые глутаральдегидом [c.290]

Полимер конканавалина А, иолучеи-ный с помощью глутаральдегида Биогель Р-300 с глутаральдегидом Конкавалин А — сефароза СН-сефароза 4В [c.314]

Антитела, сшитые глутаральдегидом л-Аминобензилцеллюлоза Биогель А-15 Сефароза 48 [c.361]

Рис. 4-14. Глутаральдегид и тетраоксид осмия наиболее распространенные фиксаторы, используемые в электронной микроскопии. Две реакционноспособные альдегидные группы глутаральдегида позволяют сщивать различные типы молекул с помощью ковалентных связей, вытесняющих атомы водорода (выделены цветом). Тетраоксид. осмия восстанавливает многие органические соединения, с которыми образует поперечно-сщитые комплексы. Это свойство особенно пенно в случае клеточных мембран поскольк тетраоксид осмия реагирует с двойными

Иногда перед негативным контрастированием оказывается полезной химическая фиксация микроорганизмов. Ее применяют для того, чтобы избежать структурных изменений и искажений из-за действия растворов с разными pH и осмотическими свойствами, из-за действия самих красителей или из-за высушивания в красителе. Фиксацию проводят в растворах глута-ральдегида низкой концентрации, а иногда суспензию на сетке подвергают действию паров глутаральдегида в закрытом сосуде. Перед окраской фиксированные бактерии нуждаются в отмывке либо прямым способом, либо путем отмывки сеток методами, упомянутыми выше. В итоге часто наблюдается в какой-то степени позитивное окрашивание, а задержка красителя вокруг фиксированного микроорганизма такова, что для окрашивания можно применять значительно менее концентрированные растворы красителя. [c.104]

К клеточной суспензии или жидкой культуре добавляют равный объем 5%-ного глутаральдегида в 0,2 М Ыа-какодилатном буфере, pH 7,4 (конечная концентрация глутаральдегида 2,5%)- В другом варианте клетки центрифугируют и суспендируют осадок в 2,5%-ном глу- [c.108]

Молекулярная биология клетки Том5 (1987) -- [ c.171 ]

Биология Том3 Изд3 (2004) -- [ c.215 ]

Аффинная хроматография Методы (1988) -- [ c.33 , c.88 , c.89 ]

Основы гистохимии (1980) -- [ c.31 , c.36 , c.37 , c.46 , c.52 , c.53 , c.226 , c.260 , c.302 ]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология