Карбоангидразы апофермент

Многие ферменты представляют собой сложные белки, образованные простым белком — апоферментом ( апо означает вне, отдельно от ) и одной (или более) молекулой или ионом, называемыми кофер-ментами. Некоторые коферменты являются ионами металлов. Примером может служить карбоангидраза в эритроцитах человека. Ее апо-фермент имеет молекулярную массу 28 000. Апофермент соединяется с одним ионом цинка (Zn2+) и образует активный фермент, который ка- [c.396]

Изменение спектральных свойств под воздействием сульфамидов будет обсуждено в разд. 4. С помощью Н-ацетазоламида можно непосредственно показать, что для связывания этого сульфамида необходим ион металла (рис. 16.9, а) [21]. При концентрациях, меньших Ю М, ацетазоламид не связывается апоферментом, тогда каж Zn(II)-карбоангидраза присоединяет 1 моль ингибитора уже при концентрации последнего 5-10 М (рис. 16.9, а). Характерно, что подобный тип взаимодействия обнаружен только с цинковыми и кобальтовыми комплексами карбоангидразы—единственными активными разновидностями металлофермента (табл. 16.8). По-видимО му, только реакционноспособная конфигурация активного центра допускает возможность связывания сульфамидов [21]. [c.586]

Обработка фермента 1,10-фенантролином или 8-оксихинолин-сульфонатом [20, 83, 84] в течение 15 дней при pH 5,5 привела к удалению цинка(II). Полученный апофермент совершенно неактивен, хотя и довольно стабилен, так как после прибавления цинка он полностью восстанавливает свою активность [20, 73, 83]. Удаление металла приводит к небольшому изменению спектров ДОВ, но основные физико-химические свойства апо- и металлофермента одинаковы. Существенны в этом отношении данные о том, что единственной особенностью разностных карт электронной плотности между кристаллами апо- и Zn-карбоангидразы является максимум плотности, отвечающий ионам цинка (рис. 16.4) [85]. Кристаллы металло- и апофермента изоморфны. Последние могут быть получены при длительной (16 суток) обработке кристаллов нативной карбоангидразы 0,01 М раствором 2,3-димеркаптопропанола-1, содержащим 2,45 М (NH4)2S04, в атмосфере водорода [85]. [c.577]

Реакции (2а) и (26) должны иметь место в очень кислых я в очень щелочных растворах соответственно, если, конечно, значения р/Са координированной молекулы НгО не выходят за пределы экспериментального интервала pH. Как показано на рис. 16.13, кривая титрования для реакции цианида с 2п(II)-карбоангидразой пересекает ось абсцисс 1 моль Н+ освобождается при pH 6,0 и 0,7 моля НО- освобождается при pH 10,1. Подобное изменение кислотно-основных равновесий является функцией металла, так как при добавлении ионов СЫ- к апоферменту pH системы не смещается. Аналогичная кривая наблюдается и для случая кобальта (рис. 16.13). Эти результаты указывают на существование еще одного равновесия с рКа 8 (пунктирная кривая на рис. 16.13). Э-кспериментальная картина согласуется со схе- [c.591]

I и 3 — кривые титрования H N и HzS, приведенные в виде доли недиссодиированного ингибитора (ордината слева) 2 — теоретическая кривая титрования для группы с р (ц=8,1, приведенная в виде отношения количества диссоциировавшего Н+ в молях на моль белка (ордината справа). эстеразная активность КАВ (мкмоль гидролизованного субстрата в I мин на 1 мкмоль фермента). 4 и 5 — теоретические [по уравнению (2)] кривые дифференциального титрования для замещения Н+ н ОН- цианидом и сульфидом соответственно как функции pH 2п(И)-карбоангидраза О апофермент Со(П)-карбоангидраза-(-СМ-(макснмальное количество Н+ и ОН- освобождается лишь тогда, когда добавлено 1,5 экв цианид-аниона) 2п(П)-карбоангидраза-1-сульфид [86]. [c.592]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология