Конструирование отдельных клеток

Методы. Для проведения генно-инженерных процедур необходимо использование ряда узкоспециализированных методов. К ним относятся секвенирование ДНК получение фрагментов ДНК выделение отдельных генов, необходимых для построения генетической программы выбор и конструирование ген-несущего вектора встраивание вектора в ДНК клетки-хозяина. [c.499]

Предположим, что имеется сдвоенная спираль ДНК, на которой в отдельных ее участках могут образовывать-ся молекулы м-РНК, являющиеся, в свою очередь, матрицами для синтеза определенных ферментов. Выделяя на ДНК тот или иной участок, можно получить различные РНК, т. е. заготовить матрицы для синтеза самых разнообразных белков, для конструирования всевозможных ферментов. Весь вопрос в том, как заставить работать именно нужный участок полинуклеотидной цепочки ДНК и подавить деятельность остальных. Если этого не сделать, то неконтролируемый синтез белков неминуемо приведет к химическому хаосу в клетке и ее гибели. [c.189]

Конструирование MA методом снизу вверх . При этом подходе искусственную минихромосому собирают из отдельных последовательностей, соответствующих теломерам, центромерам и областям начала репликации природных хромосом, с которыми объединяют требуемую рекомбинантную ДНК. Теломерные последовательности животных представляют собой тандем-но повторяющиеся последовательности вида (TTAGGG) , которые, будучи объединенными в повторы длиной 1 т.п.о., эффективно функционируют в клетках человека. В качестве областей начала репликации могут быть использованы различные последовательности, среди которых наиболее изучены соответствующие последовательности -глобинового гена человека. [c.99]

Благодаря разработке и совершенствованию методов клонирования и идентификации генов, секвенирования последовательностей ДНК, химического синтеза олигонуклеотидов, направленного мутагенеза молекул ДНК in vitro и оптимизации экспрессии целевых генов в клетках Е. соИ появилась возможность создавать мутантные формы генов и нарабатывать в достаточных для анализа количествах соответствующие им измененные варианты изучаемых белков. В целом направление исследований по конструированию методами генетической инженерии белков с измененными по отношению к природному прототипу свойствами, химерных белков, обладающих свойствами двух или более отдельных белков, и т. п., т. е. создание неприродных вариантов бежов и изучение их свойств, получило название белковая инженерия . [c.187]

Обнаружено более двух десятков мутаций, нарушающих развитие вульвы. С помощью конструирования двойных мутантов, у которых один зародыш несет две отдельные мутации, влияющие па развитие вульвы, можно определить, какие гены активны ранее других, и. следовательно, постулировать генетическую программу. Возможность наблюдать деление каждой клетки, входящей в вульву, позволяет указать точное место, где данная мутация проявляется впервые, и установить соответствие между генетической протраммой и развитием (Ferguson t al 1987), [c.133]

Одна молекула ДНК на клетку. При планировании эксперимента по молекулярному клонированию и его проведении необходимо соблюдать два основных принципа. Во-первых, после конструирования in vitro отдельные молекулы рекомбинантных ДНК должны быть введены в разные структуры. Ни одна из клеток не должна получить более одной плазмионой молекулы или вирусной частицы. Во- [c.291]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология