Метод захвата антител

Обнаружение специфических IgM к вирусу краснухи методом захвата антител [c.327]

Рис. 11.10. Стандартная кривая для определения специфичных к вирусу краснухи IgM методом захвата антител

Конкурентный иммуноанализ. Исследуемый антиген вместе с меченым антигеном наносят на подложку, покрытую специфическими антителами. Чем больше исследуемого антигена содержит раствор, тем меньше количество связывающегося стандартного меченого антигена. Анализ этого типа часто используют для определения антигенов, присутствующих в относительно высоких концентрациях, или гормонов, которые имеют только один антигенсвязывающий центр. 2. Метод двойного захвата антигена. На подложку с фиксированными антителами наносят исследуемый раствор, и если в нем присутствует антиген, он захватывается антителами. После отмывания не- [c.535]

Альтернативным методом является метод захвата антител, при котором твердую фазу вначале связывают с антителами к IgM человека. Промывают и инкубируют с тестируемой сывороткой, что приводит к захвату содержащихся в ней IgM. Лоследующая инкубация с антигеном краснухи позволяет отобрать все специфические IgM. После очередной промывки связавшийся с твердой фазой антиген вируса краснухи выявляют в реакции с меченными антителами к вирусу краснухи. [c.328]

Преимущества, присущие моноклональным антителам, обусловлены их гомогенностью. При работе в условиях избытка реагентов преимущества метода меченых антител достаточно очевидны. Во-первых, при использовании иммобилизованных на носителе антител, эффективно осуществляющих первичный захват тестируемого антигена, значительно ослабляется, а в некоторых случаях и полностью подавляется эффект насыщения, называемый эффектом загиба в области высоких концентраций (Ryall et al,, 1982), С проблемой насыщения приходится сталкиваться практически в любой системе прямого тестирования. В связи с этим создание системы анализа, в которой эта проблема исключается, имеет особо важное значение. Использование моноклональных антител позволяет одновременно легко получить сорбенты с очень высокой емкостью и вводить в систему меченые антитела в высокой концентрации. Для систем, работающих в режиме избытка антител, характерны не только быстрое выполнение анализа и высокая чувствительность определения, но и возможность использования тестируемого антигена в чрезвычайно широком диапазоне концентраций. Концентрационный диапазон, охватываемый в системах анализа, основанных на применении меченых антител, обычно в 3—10 раз шире диапазона, доступного для конкурентного анализа с применением меченого антигена. [c.388]

Справочник химика 21

Химия и химическая технология